Parmi les facteurs environnementaux affectant la vie humaine, l'air occupe une place prépondérante. La science qui étudie la microflore de l'air s'appelle l'aéromicrobiologie.
L'air n'est pas un environnement favorable au développement des micro-organismes, car il ne contient pas nutriments et est en mouvement constant. Par conséquent, la plupart des micro-organismes disparaissent rapidement de l'air. Cependant, certains d'entre eux sont plus résistants, comme le bacille tuberculeux, les spores de clostridium, les champignons et autres, peuvent persister longtemps dans l'air.
Il y a plus de micro-organismes dans l'air des villes que dans l'air des forêts et des champs.
Le nombre de micro-organismes dans l'air diminue avec la hauteur. Par exemple, à une altitude de 500 m au-dessus de Moscou dans 1 m 3 d'air, on trouve 2-3 bactéries et à une altitude de 1000 m - la moitié moins.
Le nombre de micro-organismes dans les pièces est généralement plus élevé que dans l'air des lieux ouverts.
GOST ne normalise pas les méthodes de recherche sur l'air. Auparavant, une grande attention était accordée à la définition des streptocoques hémolytiques en tant qu'indicateurs de la pollution de l'air endroits fermés microflore située dans le nasopharynx humain. Actuellement, une plus grande attention est accordée à la détection directe des micro-organismes pathogènes et opportunistes dans l'air.
L'examen sanitaire et bactériologique de l'air est effectué de manière planifiée: dans les hôpitaux, les salles d'opération, les institutions pour enfants, etc.
Dans une étude sanitaire-bactériologique, il est déterminé:
1. Le nombre total de bactéries dans 1 m 3 d'air.
2. La présence de micro-organismes pathogènes et opportunistes dans 1 m 3 d'air.
La détection des micro-organismes dans l'air est réalisée à l'aide de dispositifs spéciaux et de supports spéciaux (diagnostic et diagnostic différentiel).
Méthodes d'échantillonnage de l'air
Il existe deux méthodes principales d'échantillonnage de l'air pour la recherche : 1) la sédimentation - basée sur la sédimentation mécanique des micro-organismes ; 2) aspiration - basée sur l'aspiration d'air active (cette méthode permet de déterminer non seulement le contenu qualitatif, mais aussi quantitatif des bactéries).
Méthode de sédimentation
Des boîtes de Pétri avec un milieu nutritif (MPA) sont placées dans formulaire ouvert horizontalement, à différents niveaux du sol. La méthode est basée sur la décantation mécanique des bactéries à la surface de la gélose dans des boîtes de Pétri. Les plaques avec le milieu sont exposées pendant 10 à 20 minutes, selon la contamination de l'air attendue. Pour identifier la flore pathogène, des milieux électifs sont utilisés. L'exposition dans ces cas est prolongée à 2-3 heures.Après l'exposition, les boites sont fermées, livrées au laboratoire et placées dans un thermostat pendant 24 heures à 37°C. Le lendemain, les colonies cultivées sont examinées. Cette méthode est principalement utilisée dans des pièces fermées.
(Méthode d'aspiration )
Piège bactériologique de Rechmensky. Avant le travail, l'appareil est rempli de soude stérile. Le fonctionnement de l'appareil est basé sur l'aspiration d'air à travers celui-ci à l'aide d'un aspirateur. Cela pulvérise le liquide dans l'appareil. Après la fin de l'aspiration, le liquide traversé par l'air est ensemencé à 0,1-0,2 ml par MPA dans des boîtes de Pétri. S'il est nécessaire d'utiliser des milieux électifs, la dose d'inoculation est augmentée (0,3-0,5 ml). Le liquide obtenu dans le récepteur peut être utilisé pour infecter des animaux (par exemple, dans des études menées pour détecter des virus, des rickettsies, etc.).
Le dispositif de Dyakonov est également basé sur le piégeage des bactéries dans un liquide à travers lequel l'air passe.
Le dispositif PAB-1 est destiné à l'examen bactériologique de grands volumes d'air sur une courte période. Des échantillons d'air sont obtenus à un débit de 125-150 l / min. Le principe de fonctionnement de l'appareil est basé sur le piégeage de micro-organismes sur une électrode de charge opposée. La grande vitesse de prélèvement d'air dans cet appareil et la possibilité de l'ensemencer sur divers milieux nutritifs est importante pour la détection des bactéries pathogènes et opportunistes (par exemple, Pseudomonas aeruginosa dans les services de chirurgie, etc.).
L'appareil de Krotov. L'action est basée sur le principe de souffler un courant d'air sur le milieu dans les boîtes de Pétri. L'appareil se compose de trois parties : une unité pour l'échantillonnage de l'air, un rotamètre et une partie électrique du mécanisme d'alimentation.
L'air d'essai est aspiré dans la fente de l'appareil à l'aide d'un ventilateur centrifuge tournant à une vitesse de 4000-5000 rpm et frappe la surface d'une boîte de Pétri ouverte avec du milieu. Les micro-organismes présents dans l'air se déposent sur la gélose nutritive. Pour une répartition uniforme des micro-organismes sur toute la surface, la table avec la tasse tourne. L'air est expulsé de l'instrument par un tube à air connecté à un rotamètre, qui indique la vitesse à laquelle l'air est aspiré à travers l'instrument.
L'inconvénient de l'appareil de Krotov est qu'il a besoin d'électricité, il ne peut donc pas être utilisé dans toutes les conditions.
Premier jour de recherche
Les échantillons prélevés sont placés dans un thermostat à 37°C pendant 18-24 heures.
Deuxième jour de recherche
La boîte est sortie du four et les colonies sont comptées. La pollution bactérienne de l'air s'exprime par le nombre total de microbes dans 1 m 3 de celui-ci.
Paiement. Par exemple, 125 litres d'air sont passés en 10 minutes et 100 colonies se sont développées à la surface.
Pour déterminer Staphylococcus aureus, la clôture est réalisée sur gélose jaune-sel. Les plaques avec inoculations sont incubées dans un thermostat à 37°C pendant 24 heures et incubées pendant 24 heures à température ambiante pour identifier le pigment. Les colonies suspectes de S. aureus font l'objet d'une identification plus poussée (voir chapitre 14).
Dans les crèches, l'air est contrôlé à la recherche de Salmonella. Pour ce faire, l'air est ensemencé dans une plaque avec du milieu gélose au bismuth-sulfite.
La détection des bactéries et virus pathogènes dans l'air intérieur est réalisée selon des indications épidémiologiques. Pour identifier les agents responsables de la tuberculose, ils utilisent le dispositif POV ; l'environnement de Shkolnikova est utilisé comme moyen de piégeage.
Questions de contrôle
1. L'air est-il un environnement favorable au développement des micro-organismes ?
2. Dans quelles institutions des études de routine sur la microflore de l'air sont-elles effectuées ?
3. Parlez-nous du dispositif de l'appareil de Krotov.
Tâche
En 10 minutes, 250 litres d'air ont été traversés. 150 colonies se sont développées. Calculer le nombre de colonies dans 1 m d'air.
Exercer
Prenez 4 boîtes de Pétri avec du milieu MPA, ouvrez-les et placez-les à différentes hauteurs du sol. Au bout de 20 minutes, fermer les coupelles et placer dans le thermostat. Le lendemain, comptez le nombre de colonies qui se sont développées, déterminez le degré de pollution de l'air.
Un grand groupe d'instruments et de dispositifs est conçu pour concentrer les micro-organismes dans des échantillons d'objets environnement externe(eau, air), ainsi que dans des échantillons de matériel pathologique provenant de patients.
Comme vous le savez, les objets de l'environnement extérieur peuvent être une source d'infections massives des humains et des animaux, s'ils sont contaminés par des micro-organismes pathogènes. Pour juger de la présence de micro-organismes pathogènes dans les objets de l'environnement extérieur, le critère le plus fiable est leur détection directe. Cependant, les méthodes utilisées en pratique microbiologique ne le permettent pas toujours. Les microorganismes pathogènes sont difficiles à identifier dans les objets de l'environnement extérieur, car ils sont beaucoup moins nombreux que les saprophytes. Par conséquent, en raison d'actions antagonistes sur les milieux nutritifs, la croissance de la flore pathogène est souvent supprimée par la croissance des saprophytes. La tâche principale dans l'étude d'un objet de l'environnement extérieur tel que l'air est la concentration de micro-organismes en suspension dans une petite quantité de liquide (milieu nutritif).
L'un des principaux indicateurs de contamination bactérienne des objets environnementaux est l'indicateur du nombre microbien. Ces données de microbiologie sanitaire sont enregistrées par comptage des colonies cultivées sur boîtes de Pétri, suivi d'un comptage.
Un nombre important de travaux sont consacrés aux méthodes d'échantillonnage de l'air. Un grand nombre de dispositifs de capture d'aérosols bactériens de toutes sortes ont été proposés.
L'un des premiers instruments pour l'étude de l'aéromicroflore, qui a été introduit dans la production de masse dans notre pays, était l'instrument Krotov. Malgré le temps relativement important depuis le début de sa production en série (années cinquante), l'appareil n'a pas perdu de son importance dans l'étude de l'état sanitaire et bactériologique de l'air intérieur et est encore largement utilisé dans la pratique des laboratoires sanitaires et bactériologiques. à ce jour.
Appareil d'analyse bactériologique de l'air(Dispositif de Krotov) (Fig. 58) est un cylindre, fermé par un couvercle, sous lequel se trouve une table pour placer une boîte de Pétri avec un milieu nutritif solide. À l'intérieur du cylindre se trouve un moteur électrique qui fait tourner la table avec une tasse et une turbine qui aspire l'air dans l'appareil à travers une fente dans le couvercle. La quantité d'air aspirée par minute est déterminée par un débitmètre à flotteur et régulée par une vanne. L'appareil est alimenté par un courant alternatif avec une tension de 220 V. Les dimensions de l'appareil dans un étui sont de 229X200X280 mm. Poids - 8 kg.
Riz. 58. Dispositif d'analyse bactériologique de l'air.
1 - vanne rotamètre, 2 - rotamètre; 3 - serrures à rabat; 4 - disque rotatif; 5 - couverture; 6 - disque; 7 - fente en forme de coin; 8 - cas; 9 - socle.
La préparation de l'appareil pour le fonctionnement est réduite à la sélection de boîtes de Pétri standard d'un diamètre de 100 mm et d'une hauteur de 20 mm et à leur remplissage préalable avec un milieu nutritif en une quantité de 15 ml. Le remplissage et le refroidissement des milieux de culture s'effectuent sur une surface strictement horizontale, en séchant dans des conditions normales.
Un autre appareil destiné à un usage similaire est échantillonneur d'air POV-1(fig. 59).
Riz. 59. Échantillonneur d'air POV-1
L'échantillonnage de l'air est effectué dans un milieu nutritif liquide, ce qui permet l'utilisation de milieux électifs spécifiques et des études bactériologiques (dirigées) spéciales.
Spécifications techniques appareil POV-1
Productivité ............ 20 l / min
Alimentation AC ..... 127/220 V
Consommation électrique .......... pas plus de 18 V A
Dimensions de l'appareil ....................... 170x255x285 mm
"Pose ....................... 170X270X350"
Poids (avec emballage) ........................ pas plus de 15 kg
Aspirateur pour prélèvement d'air, modèle 822, produit par l'association "Krasnogvardeets" est destiné à l'analyse des impuretés en suspension dans l'air. Sur le panneau avant de l'appareil (Fig. 60) il y a : un bloc pour connecter l'appareil au réseau 1, un interrupteur à bascule pour allumer et éteindre l'appareil 2, une prise fusible 3, une vanne de décharge qui protège le moteur contre la surcharge lors du prélèvement d'échantillons d'air à basse vitesse 4, rotamètres (tubes coniques en verre avec flotteurs) pour déterminer le débit d'air 5, boutons de vanne rotamètre pour régler le taux d'échantillonnage 6, vis de fixation du panneau au boîtier de l'appareil 7, raccords pour raccorder des tubes en caoutchouc avec des filtres 8 et une borne pour la mise à la terre de l'appareil 9.
Riz. 60. Aspirateur pour prélèvement d'air. Explications dans le texte.
En figue. 61 spectacles Forme générale aspirateur avec porte-filtre.
L'échantillonnage est effectué lorsque l'air est aspiré à travers des filtres spéciaux à une certaine vitesse. L'air passant à travers les filtres laisse des impuretés sur ceux-ci. Connaissant la vitesse de l'air et le temps de transit, il est possible de déterminer le volume d'air qui a traversé le filtre. En déterminant la quantité d'impuretés sur le filtre, vous pouvez calculer la quantité d'impuretés par unité de volume d'air.
Aspirateur de prélèvement d'air produit par la société française "Baudard". L'aspirateur est un appareil étanche avec un dispositif de renforcement des filtres à pores fins, qui peut être facilement retiré après avoir aspiré un volume d'air donné à travers l'aspirateur et, selon le but de l'étude, étudié soit bactériologiquement (incubation du filtre avec des micro-organismes dessus sur des supports nutritifs), ou au microscope (détermination de la nature des particules retenues par le filtre, leur comptage, etc.).
Les filtres à pores fins utilisés peuvent être en papier ou en fibre de verre. Le diamètre du filtre est de 110 mm.
Le ventilateur du principe de fonctionnement centrifuge a deux vitesses et est conçu pour être alimenté par une alimentation 220 V ; puissance du moteur - 50 W; performances de l'aspirateur - de 360 à 1000 l / min, en fonction de la résistance du filtre à pores fins utilisé.
Lors de l'examen de l'eau et d'autres objets de l'environnement extérieur (sol), ainsi que des fluides biologiques humains et animaux (crachats, exsudats et transsudats) pour la présence de flore pathogène, comme dans l'étude de l'air, une concentration préliminaire de micro-organismes dans un petit volume de milieu nutritif est nécessaire, qui subit à l'avenir un examen bactériologique (microscopie, ensemencement, mise en scène de réactions biochimiques et sérologiques, etc.).
Riz. 61. Aspirateur avec porte-filtre.
Cependant, les progrès dans le domaine des méthodes de concentration de microorganismes à partir d'objets de l'environnement extérieur sont faibles, et pour la plupart nous devons nous en tenir aux anciennes méthodes qui représentent différentes façons accumulation:
- sédimentation par des moyens mécaniques- filtration, centrifugation, évaporation de l'eau ;
- dépôt de microbes par des méthodes physiques et chimiques utilisant divers coagulants ;
- concentration de microbes par flottation ;
- sédimentation des microbes avec des sérums agglutinants spécifiques ;
- l'utilisation de méthodes combinées de concentration de micro-organismes, consistant en une combinaison de méthodes de sédimentation suivie d'un semis sur des milieux nutritifs ou d'une infection d'un animal de laboratoire sensible.
Les nouvelles méthodes de concentration des micro-organismes reposent sur l'application de certains principes physiques. L'électrophorèse est l'un de ces principes physiques. L'application de cette méthode assure le déplacement d'une cellule microbienne vers l'une des électrodes situées dans un milieu liquide, sous l'influence d'une force électromotrice externe (CEM) appliquée aux électrodes. Ce principe est à la base du dispositif EFM-1 (Fig. 62). L'appareil vous permet de concentrer des cellules microbiennes avec une charge de surface positive ou négative dans un petit volume de liquide isolé (0,01-0,02 ml).
Riz. 62. Dispositif d'électrophorèse des mycobactéries EFM-1.
En plus des études sur l'eau, l'appareil peut être utilisé pour des études bactériologiques de suspensions aqueuses de produits alimentaires, divers lavages, etc. L'appareil peut également être utilisé pour détecter des micro-organismes dans divers matériaux obtenus auprès de patients, notamment pour la détection de mycobacterium tuberculosis dans des matériaux tels que le liquide céphalo-rachidien, les lavages bronchiques et gastriques, toutes sortes de ponctions, l'urine. Dans les frottis préparés à partir d'une suspension de Mycobacterium tuberculosis dans une solution saline et soumis à une concentration électrophorétique, le nombre de cellules microbiennes augmente de 10 à 15 fois par rapport aux frottis provenant de matériel natif.
L'appareil est fourni avec un ensemble d'accessoires, qui comprend 20 cuvettes incassables d'une capacité de 12 ml, électrodes, pipettes. L'appareil est alimenté par un courant alternatif avec une tension de 220 V ± 10 %, 50 Hz. Consommation d'énergie - pas plus de 20 watts. Dimensions - 405X165X205 mm. Le poids de l'appareil avec un ensemble d'accessoires est de 6 kg.
Le principe de fonctionnement de l'appareil... 10 ml du matériel d'essai sont versés dans des cuvettes spéciales fournies avec l'appareil. Au-dessus de chaque cuvette, une pipette, dans laquelle est placée une électrode en graphite, est fixée à l'aide d'un clip-support. Une partie du liquide d'essai monte de 4 à 5 mm le long du capillaire de la pipette et touche l'électrode. Selon le but de l'étude, la polarité de la CEM appliquée est établie. L'électrophorèse est recommandée pendant 1 à 3 heures.
Après avoir coupé le courant, le liquide du capillaire est extrait avec une boîte en caoutchouc dans une goutte de sérum (sérum normal de cheval ou de lapin à une dilution de 1:10), préalablement appliqué sur la surface de la lame et soigneusement mélangé avec une pipette Pasteur scellée, la préparation est séchée, fixée sur la flamme d'un brûleur et colorée selon Gram, Zil à Nielsen ou d'une autre manière.
Pour exclure la possibilité d'erreurs de diagnostic, toutes les manipulations sont effectuées avec des cuvettes, des pipettes et des lames de verre soigneusement traitées. Les électrodes en graphite doivent être remplacées après chaque essai.
Les solutions de peinture et les acides doivent être soigneusement testés bactériologiquement.
Pour augmenter la précision du comptage des colonies microbiennes cultivées, l'usine de matériel médical de Kiev produit un dispositif de comptage des colonies bactériennes. Pour compter les colonies avec un stylo électrique, des points sont appliqués au fond de la boîte à l'emplacement de chaque colonie, tandis que les contacts du stylo électrique sont fermés et une impulsion électrique arrivant au compteur compte. Apparence l'appareil est représenté sur la fig. 63.
Riz. 63. Appareil pour compter les colonies.
Pour compter le nombre de colonies sur une boîte fermée, un crayon ou un stylo est utilisé pour marquer le dos de la boîte, ce qui élimine la possibilité de recompter la même colonie.
Compteur universel pour compter les colonies sur milieu nutritif "Bactronic" complet avec embout électronique pour compter le nombre de colonies sur plaques ouvertes. Au contact d'un support agarisé, la pointe active un mécanisme de compteur électromagnétique et laisse une trace à la surface du support.
Un tel dispositif élimine les décharges électriques qui se produisent lors de l'utilisation d'autres systèmes.
Lors du comptage du nombre de colonies sur des plaques à croissance clairsemée, vous pouvez utiliser le bouton sur le tableau de bord, et si nécessaire, un interrupteur à bouton-poussoir à distance, ce qui facilite le travail.
Millipore produit un spécial valise de recherche microbiologique... La valise, qui est essentiellement un laboratoire portable (Fig. 64), fournit tous matériel nécessaire et équipements pour la recherche de la pollution bactérienne de l'eau, détection de micro-organismes dans l'air et dans le sol, contrôle de la température et de la croissance des bactéries, détection des champignons de levure dans environnement, formation de gaz par les levures, détermination de l'efficacité des désinfectants, etc.
Riz. 64. Valise pour la recherche microbiologique.
Pour déterminer la qualité des produits alimentaires, luminoscope LPK-1... Il peut être utilisé pour déterminer l'espèce de viande, la détérioration précoce du porc et de la graisse de porc, le rapport composants viande hachée, examen des huiles, graisses, miel et autres produits comestibles (fig. 65).
L'appareil utilise le principe de l'analyse de luminescence visuelle. Sous l'influence des rayons ultraviolets, les produits alimentaires, en fonction de leurs propriétés et de leur qualité, commencent à briller de différentes couleurs et des filtres lumineux mettent en évidence les parties correspondantes du spectre. Lorsqu'il travaille avec l'appareil, l'obscurcissement de la pièce n'est pas nécessaire, le chercheur est protégé de l'exposition aux rayons ultraviolets.
Le mode de fonctionnement de l'appareil est répétitif. Temps de travail - 1 heure, pause - 25 minutes. La recherche du produit ne prend pas plus d'une minute. Alimentation de l'appareil à partir du réseau à courant alternatif - 220 V ± 10%. Consommation d'énergie - pas plus de 350 watts. dimensions- 366X185X240 mm. Poids - 6 kg.
Riz. 65. Dispositif de détermination de la qualité des produits LPK-1.
1.1 Dispositions générales.
L'organisation doit planifier et développer les processus nécessaires pour créer des produits sûrs.
L'organisation doit mettre en œuvre, mettre en œuvre et assurer l'efficacité des activités planifiées et de leurs modifications. Celui-ci comprend le BPR ainsi que le plan opérationnel BPR et/ou HACCP.
1.2Programmes de base (BPR).
1.2.1 L'organisme doit établir, mettre en œuvre et maintenir des programmes de base (BSP) qui contrôlent :
a) la probabilité d'introduire des facteurs de danger alimentaire dans le produit via l'environnement de travail,
b) contamination biologique, chimique et physique du ou des produits, y compris la contamination croisée entre les produits, et
c) les niveaux de dangers dans le produit et son environnement de transformation.
1.2.2 Le BPR doit :
a) répondre aux besoins de l'organisation en matière de sécurité sanitaire des aliments,
b) être adaptés à l'échelle et au type de production et à la nature des produits fabriqués et/ou transformés,
c) s'enraciner dans le réseau système interne production, en tant que programmes appliqués universellement, ou en tant que programmes appliqués à un produit ou à une ligne de production spécifique, et
d) être approuvé par l'équipe de salubrité des aliments.
L'organisation doit identifier les exigences statutaires et réglementaires liées à ce qui précède.
1.2.3 Lors de la sélection et/ou de l'établissement d'un BPR, l'organisation doit prendre en compte et utiliser les informations pertinentes [par exemple, les exigences légales et légales, les exigences des clients, les directives reconnues, les principes du Codex Alimentarius, les codes de pratique, les normes nationales, internationales ou industrielles ] .
REMARQUE. L'annexe C énumère les publications pertinentes du Codex.
Lors de l'établissement de ces programmes, l'organisation doit tenir compte des éléments suivants :
a) la conception et l'aménagement des bâtiments et des services connexes ;
d) l'aménagement des locaux, y compris les lieux de travail et les locaux auxiliaires pour les travailleurs ;
c) la fourniture d'air, d'eau, d'électricité et d'autres services publics ;
d) les services de soutien, y compris l'élimination des déchets et des eaux usées ;
f) l'adéquation de l'équipement et sa disponibilité pour le nettoyage, l'entretien et la maintenance ;
f) la gestion des matériaux achetés (par exemple : matières premières, ingrédients, produits chimiques et emballages), l'approvisionnement (par exemple : eau, air, vapeur et glace), l'élimination (par exemple : déchets et eaux usées) et la manipulation des produits (par exemple : stockage et transport ) ;
g) les mesures visant à prévenir la contamination croisée ;
h) nettoyage et assainissement ;
i) la lutte antiparasitaire ;
j) l'hygiène du personnel ;
k) autres aspects pertinents.
La vérification du BPR doit être planifiée (voir 1.8) et le BPR doit être modifié si nécessaire (voir 1.1). Des enregistrements des vérifications et des modifications doivent être conservés.
Les documents doivent décrire comment les activités incluses dans le BPO sont gérées.
1.3 Étapes préliminaires pour l'analyse des dangers.
1.3.1 Généralités.
Toutes les informations requises pour effectuer une analyse des dangers doivent être collectées, conservées, mises à jour et documentées. Les enregistrements doivent être conservés.
1.3.2 Équipe de salubrité des aliments.
Une équipe de sécurité alimentaire devrait être nommée.
L'équipe de sécurité sanitaire des aliments doit avoir des connaissances et une expérience multidisciplinaires dans la conception et la mise en œuvre d'un système de sécurité sanitaire des aliments. Cela comprend, mais sans s'y limiter, la connaissance des produits, des processus, de l'équipement et des dangers pour la sécurité alimentaire de l'organisation dans le cadre du système de sécurité alimentaire.
Des enregistrements doivent être conservés pour démontrer que le groupe possède les connaissances et l'expérience requises (voir 6.2.2).
1.3.3 Caractéristiques du produit.
1.3.3.1 Matières premières, ingrédients et matériaux en contact avec les aliments.
Toutes les matières premières, ingrédients et matériaux en contact avec les aliments doivent être documentés dans la mesure nécessaire pour l'analyse des dangers (voir 1.4), y compris les éléments suivants, le cas échéant :
a) caractéristiques biologiques, chimiques et physiques,
b) la composition des ingrédients de la recette, y compris les additifs et les auxiliaires technologiques,
c) l'origine,
d) méthode de fabrication,
f) les modalités d'emballage et de livraison,
f) les conditions de stockage et la durée de conservation,
g) préparation et/ou manipulation avant utilisation ou manipulation,
h) les critères d'acceptation liés à la sécurité alimentaire ou aux spécifications des matériaux et ingrédients achetés en fonction de leur utilisation prévue.
L'organisation doit identifier les exigences légales et légales en matière de sécurité sanitaire des aliments liées à ce qui précède.
1.3.3.2 Caractéristiques du produit final.
Les caractéristiques des produits finis doivent être documentées dans la mesure nécessaire pour l'analyse des dangers (voir 1.4), y compris les informations suivantes, le cas échéant :
a) nom du produit ou autre identification,
b) composition,
c) les caractéristiques biologiques, chimiques et physiques pertinentes pour la sécurité sanitaire des aliments,
d) la date de péremption et les conditions de conservation indiquées,
f) emballage,
f) l'étiquetage de sécurité alimentaire et/ou les instructions de manipulation, de préparation et d'utilisation,
g) mode(s) de distribution.
L'organisation doit identifier les exigences légales et légales en matière de sécurité sanitaire des aliments liées à ce qui précède.
Les descriptions doivent être mises à jour, y compris, si nécessaire, les dispositions de la clause 1.1.
1.3.4 Utilisation prévue.
L'utilisation prévue, la manipulation raisonnablement attendue du produit final et toute mauvaise manipulation et mauvaise utilisation non intentionnelles mais raisonnablement anticipées du produit final doivent être examinées et documentées dans la mesure où une analyse des dangers peut être effectuée (voir 1.4.) ...
Les groupes d'utilisateurs et, le cas échéant, les groupes de consommateurs devraient être définis pour chaque produit, et les groupes de consommateurs particulièrement vulnérables par rapport à des dangers spécifiques devraient être pris en compte.
Les descriptions doivent être mises à jour, y compris, si nécessaire, les dispositions de la clause 1.1.
1.3.5 Organigrammes, étapes du processus et contrôles.
1.3.5.1 Organigrammes.
Des organigrammes doivent être préparés pour les catégories de produits ou les processus couverts par le système de gestion de la sécurité sanitaire des aliments. Les organigrammes devraient constituer la base de l'évaluation apparence possible, augmentant ou introduisant des facteurs provoquant des risques pour la sécurité sanitaire des aliments.
Les organigrammes doivent être clairs, précis et suffisamment détaillés.
Les organigrammes doivent inclure les éléments suivants, le cas échéant :
a) la séquence et l'interaction de toutes les étapes de la production,
b) tous processus tiers et travaux sous-traités,
c) lorsque les matières premières, les ingrédients et les intermédiaires entrent en production,
d) où le retravail et la réutilisation ont lieu,
f) lorsque des produits finis ou des produits intermédiaires, ainsi que des sous-produits et des déchets sont rejetés ou éliminés,
Conformément à 1.8, l'équipe de sécurité alimentaire doit vérifier l'exactitude de la charte actuelle sur place. Les organigrammes validés doivent être conservés en tant qu'enregistrements.
1.3.5.2 Description des étapes et des contrôles du processus.
Les contrôles existants, les paramètres de processus et/ou la précision avec laquelle ils sont exécutés ou les procédures affectant la sécurité sanitaire des aliments doivent être décrits dans la mesure nécessaire pour l'analyse des dangers (voir 1.4).
Les exigences externes (par exemple, les autorités réglementaires ou les clients) qui peuvent influencer le choix et l'exactitude des mesures de contrôle doivent également être décrites.
Les descriptions doivent être mises à jour, y compris, si nécessaire, les dispositions de la clause 1.1.
1.4 Analyse des facteurs dangereux.
1.4.1 Généralités.
L'équipe de salubrité des aliments doit effectuer une analyse des dangers pour déterminer quels dangers doivent être contrôlés, le degré de contrôle pour assurer la salubrité des aliments et quel complexe de contrôles est nécessaire.
1.4.2 Identification des dangers et établissement de niveaux acceptables.
1.4.2.1 Tous les dangers pouvant raisonnablement survenir en fonction du type de produit, du type de procédé et de la réalité locaux industriels doivent être identifiés et enregistrés. L'identification doit être basée sur :
a) les informations et données préliminaires collectées conformément à la clause 1.3.,
b) expérience,
c) des informations externes, y compris autant de données épidémiologiques et autres données historiques que possible, et
d) les informations sur la sécurité sanitaire des aliments obtenues tout au long de la chaîne alimentaire qui peuvent être pertinentes pour la sécurité sanitaire des produits finaux ou intermédiaires et des aliments à la consommation.
Chaque étape (des matières premières, de la production à la distribution) à laquelle l'un des dangers pour la sécurité alimentaire peut être introduit doit être spécifiée.
1.4.2.2 Lors de l'identification des dangers, tenez compte des éléments suivants :
a) les étapes précédant et suivant l'opération considérée,
b) équipement technologique, services / services et environnement, et
c) les maillons en amont et en aval de la chaîne de production alimentaire.
1.4.2.3 Pour chaque danger identifié pour la sécurité sanitaire des aliments, un niveau de danger acceptable dans le produit final doit être établi, dans la mesure du possible.
L'établissement de ce niveau doit tenir compte des exigences légales et légales, des exigences de sécurité alimentaire des clients, de l'utilisation prévue par le client et d'autres données pertinentes.
La validité et les résultats de l'établissement doivent être enregistrés.
1.4.3 Évaluation des facteurs de danger.
Une évaluation des dangers devrait être effectuée pour déterminer, pour chaque danger pour la sécurité sanitaire des aliments (voir 1.4.2), s'il est essentiel pour la production d'aliments sûrs de l'éliminer ou de le réduire à des niveaux acceptables, et si le contrôle est nécessaire pour s'assurer que les niveaux acceptables identifiés sont atteints.
Chaque danger pour la sécurité sanitaire des aliments doit être évalué en fonction de la gravité possible et de la probabilité d'effets nocifs sur la santé.
La méthodologie utilisée doit être décrite et les résultats de l'évaluation des dangers enregistrés.
1.4.4 Sélection et évaluation des mesures de contrôle.
Sur la base de l'évaluation des dangers de la clause 1.4.3, il convient de sélectionner un ensemble approprié de mesures de contrôle capables de prévenir, d'éliminer ou de réduire les facteurs provoquant des dangers alimentaires à certains niveaux acceptables.
Dans cette sélection, chaque mesure de maîtrise de 1.3.5.2 doit être examinée pour son efficacité par rapport aux dangers identifiés.
Les mesures de contrôle sélectionnées doivent être classées (évaluées) en fonction de la nécessité de les contrôler à l'aide d'un BPR opérationnel ou d'un plan HACCP.
La sélection et le classement des mesures doivent être effectués à l'aide d'une approche logique qui comprend une évaluation prenant en compte les éléments suivants :
a) son effet sur les dangers identifiés par rapport à la précision spécifiée,
b) la faisabilité de son contrôle (par exemple la capacité de le contrôler régulièrement pour assurer une correction immédiate) ;
c) sa position dans le système par rapport aux autres commandes ;
d) la probabilité d'échec de la mesure de contrôle ou de variabilité significative du processus ;
f) la gravité des conséquences en cas de défaillance de son fonctionnement ;
f) si une mesure de contrôle est établie et appliquée spécifiquement pour éliminer ou réduire considérablement le niveau du ou des dangers ;
g) les synergies (c'est-à-dire les interactions qui surviennent entre deux ou plusieurs contrôles qui aboutissent à un résultat supérieur à la somme de leurs résultats individuels).
Les mesures de contrôle classées comme pertinentes pour le plan HACCP doivent être mises en œuvre conformément à 1.6. D'autres contrôles doivent être mis en œuvre en tant que BPR opérationnels conformément à la clause 1.5.
La méthodologie et les paramètres utilisés pour ce classement doivent être documentés et les résultats des évaluations doivent être enregistrés.
1.5 Mise en place de programmes de base opérationnelle (BPP).
Les BPO opérationnels doivent être documentés et doivent inclure, pour chaque programme, les informations suivantes :
a) facteur(s) provoquant un danger alimentaire, maîtrisé(s) par le programme (voir 1.4.4.),
b) mesures de maîtrise (voir 1.4.4.),
c) les procédures de suivi démontrant la mise en œuvre du BPR opérationnel ;
d) les corrections et actions correctives à entreprendre en cas de détection d'une perte de contrôle dans le processus de surveillance du BPR opérationnel (voir respectivement la clause 1.10.1 et la clause 1.10.2.),
f) responsabilité et autorité,
f) les enregistrements de contrôle.
1.6 Mise en place d'un plan HACCP.
1.6.1 Plan HACCP.
Le plan HACCP doit être documenté et doit inclure les informations suivantes pour chaque point de contrôle critique (CCP) :
a) les facteurs provoquant le danger des denrées alimentaires doivent être contrôlés dans le KTU (voir clause 1.4.4.),
b) mesures de maîtrise (voir 1.4.4.),
c) limites critiques (voir 1.6.3.)
d) procédure(s) de surveillance (voir 1.6.4),
e) les corrections et actions correctives à entreprendre en cas de dépassement des limites critiques (voir 1.6.5) ;
f) responsabilités et pouvoirs ;
g) les enregistrements de contrôle.
1.6.2 Identification des points de contrôle critiques (CCP).
Pour chaque danger maîtrisé conformément au plan HACCP, les HAC doivent être identifiés pour les mesures de maîtrise identifiées (voir 1.4.4.).
1.6.3 Détermination des limites critiques pour les points critiques de gestion.
Des limites critiques doivent être définies pour la surveillance attribuée à chaque KTU.
Des limites critiques doivent être établies pour garantir que le niveau de danger acceptable identifié dans le produit final (voir 1.4.2.) n'est pas dépassé.
Les limites critiques doivent être mesurables.
La justification des limites critiques choisies doit être documentée.
Les limites critiques basées sur des données subjectives (telles que l'inspection visuelle d'un produit, d'un processus, d'un traitement, etc.) doivent être étayées par des instructions ou des spécifications et/ou une éducation et une formation.
1.6.4 Système de surveillance des points critiques de gestion.
Un système de surveillance doit être installé pour chaque engin de transport afin de démontrer que l'engin de transport est sous contrôle. Ce système doit inclure toutes les mesures ou observations prévues liées aux limites critiques.
Le système de surveillance doit comprendre des procédures, des instructions et des enregistrements appropriés couvrant les éléments suivants :
a) des mesures ou des observations qui fournissent des résultats dans un délai adéquat,
b) les dispositifs de surveillance utilisés,
c) les méthodes d'étalonnage utilisées (voir 8.3) ;
d) fréquence de surveillance ;
f) responsabilité et autorité liées au suivi et à l'évaluation des résultats du suivi ;
f) exigences en matière d'enregistrement et méthodes de conservation des enregistrements
Les méthodes et la fréquence de surveillance doivent permettre de déterminer à temps les dépassements de seuils critiques, afin d'isoler le produit avant son utilisation ou sa consommation.
1.6.5 Mesures prises lorsque les limites critiques sont dépassées sur la base des résultats de la surveillance.
Les corrections prévues et les actions correctives à entreprendre lorsque les limites critiques sont dépassées doivent être décrites dans le plan HACCP. Ces actions doivent garantir que la cause des non-conformités est identifiée, que les paramètres contrôlés dans la CTU sont renvoyés sous contrôle et que la récurrence de la non-conformité est empêchée (voir la clause 1.10.2).
Des procédures documentées doivent être établies et suivies pour assurer une gestion appropriée des produits dangereux et s'assurer qu'ils ne sont pas diffusés sans évaluation préalable (voir 1.10.3).
1.7 Mettre à jour les informations préliminaires et les documents décrivant le plan BPR et HACCP.
Après l'approbation du BPR opérationnel (voir clause 1.5) et/ou du plan HACCP (voir clause 1.6), l'organisme doit mettre à jour les informations suivantes, si nécessaire :
a) les caractéristiques des produits (voir clause 1.3.3) ;
b) l'utilisation prévue (voir 1.3.4) ;
c) diagrammes de séquence (voir 1.5.5.1);
d) étapes du processus (voir 1.3.5.2);
f) mesures de maîtrise (voir 1.3.5.2).
Si nécessaire, des modifications doivent être apportées au plan HACCP (voir clause 1.6.1) et aux procédures et instructions décrivant le BPR (voir clause 1.2).
1.8 Planification de la vérification.
Lors de la planification de la vérification, les objectifs, les méthodes, la fréquence et les responsabilités pour la conduite de la vérification doivent être définis. Les activités de vérification doivent démontrer que :
a) les BPR sont effectuées (voir clause 1.2),
b) les entrées de l'analyse des dangers (voir 1.3) sont mises à jour en permanence,
c) les BPR opérationnels (voir 1.5) et les éléments du plan HACCP (voir 1.6.1) sont mis en œuvre et efficaces,
d) les niveaux de danger se situent dans les limites acceptables (voir 1.4.2), et
f) d'autres procédures requises par l'organisation sont en place et sont efficaces.
Le résultat de cette planification doit se présenter sous une forme adaptée aux méthodes de fonctionnement de l'organisation.
Les résultats de la vérification doivent être enregistrés et communiqués à l'équipe de sécurité sanitaire des aliments.
Les résultats de la vérification doivent être fournis pour étayer l'analyse des résultats des activités de vérification (voir 8.4.3).
Si le système de vérification est basé sur le test d'échantillons du produit final et si ce test des échantillons révèle une non-conformité avec le niveau acceptable de danger (voir 1.4.2), les lots correspondants du produit doivent être traitées comme potentiellement dangereuses conformément au paragraphe 1.10.3.
1.9Système de traçabilité.
L'organisme doit établir et mettre en œuvre un système de traçabilité qui identifie les lots de produits en relation avec les expéditions de matières premières, les enregistrements de production et les enregistrements d'approvisionnement.
Le système de traçabilité doit être en mesure d'identifier le matériel entrant du fournisseur direct et le chemin de distribution initial du produit final.
Les enregistrements de traçabilité doivent être conservés sur une période spécifiée pour évaluer le système afin de garantir que les produits potentiellement dangereux sont manipulés et en cas de retrait du produit. Les enregistrements doivent être conservés conformément aux exigences légales et légales et aux exigences des clients, et peuvent, par exemple, être basés sur l'identification du lot du produit final.
1.10 Gestion des non-conformités.
1.10.1 Corrections.
L'organisme doit s'assurer qu'en cas de dépassement de la limite critique de KTU (voir 1.6.5) ou de perte de contrôle des BPR opérationnels, l'identification et la gestion des produits concernés, en tenant compte de leur utilisation et de leur rejet.
Une procédure documentée doit être établie et suivie. Il doit définir :
a) l'identification et l'évaluation des produits finis affectés afin de déterminer la manipulation appropriée (voir 1.10.3), et
b) examen des corrections apportées.
Les produits fabriqués au-dessus des niveaux critiques sont potentiellement dangereux et doivent être manipulés conformément à 1.10.3. Les produits fabriqués dans des conditions opérationnelles de BPR doivent être évalués au regard des causes des non-conformités et de leurs conséquences dans le cadre de la sécurité alimentaire, et le cas échéant, ils doivent être manipulés conformément à la clause 1.10.3. L'évaluation doit être enregistrée.
Toutes les corrections doivent être approuvées responsable(par des personnes) et doivent être enregistrées avec des informations concernant la nature des non-conformités, leurs causes et leurs conséquences, y compris les informations nécessaires à des fins de traçabilité en ce qui concerne les lots non conformes.
1.10.2 Mesures correctives.
Les données obtenues à la suite de la surveillance du BPD opérationnel et du KTU doivent être évaluées par une ou plusieurs personnes désignées ayant des connaissances suffisantes (voir clause 6.2) et l'autorité (voir clause 5.4) pour initier des actions correctives.
Des actions correctives doivent être menées lorsque les limites critiques sont dépassées (voir 1.6.5) ou lorsqu'il y a un manque de conformité avec le BPR opérationnel.
L'organisme doit établir et mettre en œuvre des procédures documentées qui définissent les actions appropriées pour identifier et éliminer les causes des non-conformités détectées, pour empêcher la récurrence et pour remettre le processus ou le système sous contrôle après la détection d'une non-conformité.
Ces actions comprennent :
a) l'analyse des non-conformités (y compris les réclamations clients) ;
b) l'analyse des tendances à partir des résultats de surveillance qui peuvent indiquer une évolution vers une perte de contrôle ;
c) déterminer les causes des non-conformités,
d) une évaluation des actions nécessaires pour éviter la récurrence des non-conformités ;
f) identifier et mettre en œuvre les actions requises ;
f) enregistrer les résultats des mesures correctives prises, et
g) passer en revue les actions correctives prises pour confirmer leur efficacité.
Les actions correctives doivent être enregistrées.
1.10.3 Manipulation de produits potentiellement dangereux.
1.10.3.1 Généralités.
L'organisme doit traiter les produits non conformes en prenant des mesures pour empêcher les produits non conformes d'entrer dans la chaîne alimentaire jusqu'à ce qu'il soit certain que :
a) les dangers pour la sécurité sanitaire des aliments ont été réduits à des niveaux acceptables identifiés,
b) les dangers pour la sécurité sanitaire des aliments considérés sont réduits à des niveaux acceptables identifiés (voir 1.4.2) avant d'entrer dans la chaîne alimentaire, ou
c) les produits satisfont au niveau acceptable du danger alimentaire considéré, malgré la non-conformité.
Tous les lots de produits concernés par la situation de non-conformité doivent être sous le contrôle de l'organisme jusqu'à leur évaluation.
Si des produits dont l'organisme a perdu le contrôle s'avèrent dangereux, l'organisme devrait en informer les parties intéressées concernées et lancer le retrait (voir 1.10.4).
REMARQUE. Le terme « saisie » comprend les rappels d'aliments.
Les mesures de contrôle, la réponse appropriée et l'autorisation de manipulation de produits potentiellement dangereux doivent être documentées.
1.10.3.2 Évaluation pour la libération des produits.
Chaque lot de produits concernés par la non-conformité ne doit être libéré comme sûr que lorsque l'une des conditions suivantes est remplie :
a) des preuves autres que le système de surveillance démontrent que les contrôles ont été efficaces,
b) il est confirmé que le résultat combiné des mesures de contrôle pour de ce produit satisfait au critère visé (c'est-à-dire les niveaux acceptables identifiés conformément à 1.4.2) ;
c) Les résultats des tests d'échantillons, de l'analyse et/ou d'autres activités de vérification démontrent que le lot de produits concerné répond aux niveaux acceptables identifiés des dangers considérés.
1.10.3.3 Manipulation du produit non conforme.
Si un lot d'un produit n'est pas acceptable pour la libération, l'une des actions suivantes doit être effectuée avec lui :
a) un traitement ou un traitement ultérieur à l'intérieur ou à l'extérieur de l'organisme qui élimine ou réduit le danger à des niveaux acceptables ;
b) destruction et/ou élimination en tant que déchet.
1.10.4 Retrait.
Afin d'assurer et de faciliter la saisie complète et en temps opportun des lots de produit final qui ont été identifiés comme dangereux :
a) la haute direction devrait désigner du personnel ayant le pouvoir d'initier un retrait et désigner le personnel responsable de l'exécution du retrait, et
b) l'organisme doit établir et maintenir une procédure documentée pour :
1) notifier les parties intéressées concernées (par exemple : les législateurs, les régulateurs, les clients et/ou les consommateurs),
2) la manutention des produits saisis, ainsi que des envois dangereux de produits encore en stock, et
3) établir la séquence des actions nécessaires.
Le retrait des produits doit être protégé ou surveillé jusqu'à ce qu'ils soient détruits, utilisés à des fins autres que leur utilisation initiale prévue, déterminés comme sûrs pour leur destination initiale (ou autre), ou traités pour garantir leur sécurité.
Les informations sur la cause, l'étendue et l'effet du retrait doivent être enregistrées et communiquées à la haute direction en tant qu'entrée pour la revue de direction (voir 5.8.2).
L'organisme doit vérifier et enregistrer l'efficacité du programme de retrait en utilisant des méthodes appropriées (par exemple, retrait simulé ou retrait pratique).
Lors du prélèvement d'un échantillon d'air pour déterminer le niveau de contamination microbienne, il est nécessaire de respecter les conditions obligatoires suivantes : un échantillon d'air est prélevé au plus tôt 30 minutes après le nettoyage de la pièce, alors que les fenêtres et les portes doivent être fermées, la hauteur de l'échantillonnage doit correspondre à la hauteur du bureau. Il est nécessaire d'effectuer le contrôle dans des vêtements technologiques stériles en tissu non pelucheux et des gants.
Avant de placer l'appareil dans une pièce "propre", il doit être essuyé avec une serviette constituée d'un chiffon non pelucheux aux bords traités, humidifié avec de l'alcool éthylique à 76%. Le transfert de l'appareil vers les installations de production de 1 et 2 classes et, de préférence, 3 classes de propreté doit être effectué par le sas pour les matériaux. Le contrôle de la pureté de l'air doit être effectué au moins 2 fois par semaine avant et pendant le processus de production aux points recommandés.
Détermination de la pollution microbienne de l'air intérieur par la méthode sédimentation consiste en la sédimentation (décantation) de la microflore (dans l'air), sous l'influence de la gravité, à la surface du milieu nutritif.
Cette méthode est utilisée pour une évaluation approximative de la contamination microbienne de l'air dans les locaux industriels, principalement dans les pièces à pollution atmosphérique accrue et dans les cas où il est impossible d'étudier par la méthode d'aspiration (lorsqu'elle est utilisée dans la production de substances inflammables ou explosives) .
Dans les locaux industriels, le contrôle du contenu des micro-organismes est effectué principalement dans les zones de travail où se trouvent les sources les plus probables de contamination microbienne de l'air (lieux avec grande quantité personnel, risque accru de formation de poussière, etc.), ainsi que dans les zones où les substances, les excipients et le produit fini sont en contact direct avec l'environnement.
L'ensemencement est réalisé sur boîtes de Pétri ouvertes avec de la gélose viande-peptone (pour déterminer le nombre de bactéries) et séparément avec de la gélose Sabouraud (pour déterminer le nombre de champignons). Les gobelets sont placés à plusieurs endroits du local : en long et en étroit - en 4 points horizontalement à une distance n'excédant pas 5 m les uns des autres ; dans des pièces jusqu'à 15 m2 - à deux points opposés de la pièce; plus de 100 m2 - à chacun des 4 points opposés et au centre de la pièce. Après 10 min d'exposition à l'état ouvert, les coupelles sont fermées et placées dans un thermostat.
Les inoculations sur gélose viande-peptone sont incubées à une température de 32,5 ± 2,5 °C, sur gélose Sabouraud - à 22,5 ± 2,5 °C pendant 5 jours.
Prise en compte des résultats de la recherche... Pour déterminer le nombre total de bactéries (champignons) dans 1 m3 d'air, le nombre de colonies cultivées sur une plaque est multiplié par l'un des facteurs présentés dans le tableau "calcul du nombre de micro-organismes dans 1 m3 d'air avec 10 minutes d'exposition":
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Diamètre de la tasse, cm |
Surface de la tasse, cm2 |
Facteur |
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Ex : 50 colonies bactériennes se sont développées sur une boîte de 10 cm. Pour 1 m3 d'air, le nombre total de bactéries est de 50 x 60 = 3000.
Cependant, cette méthode ne donne pas une image complète du contenu quantitatif des micro-organismes. Cela est dû au fait que la décantation des micro-organismes dépend de la vitesse de circulation de l'air, qui peut différer en différents points de la pièce. De plus, lors de l'utilisation de cette méthode, des fractions finement dispersées d'aérosols bactériens sont mal capturées et lors de l'inoculation d'une particule d'aérosol contenant plusieurs micro-organismes viables, une seule colonie se développe, ce qui réduit les indicateurs de pollution microbienne générale de l'air.
Par conséquent, la méthode de sédimentation est approximative par rapport à l'évaluation du degré réel de contamination microbienne de l'air intérieur. Néanmoins, il peut servir à déterminer la dynamique de la contamination microbienne de l'air, à évaluer l'efficacité des mesures anti-épidémiques.
Détermination de la pollution microbienne de l'air méthode d'aspiration réalisée à l'aide de préleveurs inertiels - un impacteur ou un appareil d'analyse bactériologique de l'air (appareil à fentes de Krotov, d'où un autre nom de la méthode : méthode des fentes pour piéger les bactéries). Le fonctionnement de l'appareil est basé sur le principe de l'impact d'un flux d'air à la surface du milieu nutritif, qui est placé dans une boîte de Pétri.
Lors de l'utilisation de l'appareil de Krotov, l'air est aspiré par un ventilateur centrifuge à travers une fente en forme de coin située radialement au-dessus de la boîte de Pétri. Le disque, sur lequel la boîte de Pétri est fixée, tourne à une vitesse de 1 tour / s, ce qui permet à l'inoculation de micro-organismes de se produire uniformément sur toute la surface du milieu nutritif.
L'emplacement et le nombre de points de prélèvement d'air sont déterminés en fonction de la taille de la pièce (voir méthode de sédimentation).
La boîte de Pétri avec le milieu nutritif est placée sur le disque de l'appareil, le couvercle est soigneusement fermé à l'aide des pinces installées sur son corps. L'appareil est connecté au réseau, à l'aide d'un rhéomètre, la vitesse de l'air est réglée - 25 ou 40 l / min. En moyenne, un échantillon d'air est prélevé dans les 5 minutes à un débit de 40 l/min.
Après prélèvement d'un échantillon d'air (en chaque point précis sur deux boîtes de Pétri parallèles avec MPA et milieu de Sabouraud), les boîtes sont fermées par des couvercles et placées dans un thermostat. Média culturel, régime de température et les temps d'incubation des cultures sont les mêmes que dans l'étude de l'air par sédimentation (voir ci-dessus).
Comptabilisation des résultats... Le calcul est effectué selon la formule :
X = a x 1000 / b, où X est le nombre de micro-organismes dans 1 m3 d'air ; a - le nombre de colonies qui se sont développées sur une boîte de Pétri après la période d'incubation ; c - le volume de l'échantillon d'air investigué, ramené aux conditions normales (voir la formule pour ramener le volume d'air aux conditions normales pour la méthode d'aspiration).
Autre méthode de calcul : le nombre de colonies de champignons et de bactéries qui se sont développées sur des plaques parallèles est compté, la moyenne arithmétique est déterminée et multipliée par 5.
Les résultats obtenus sont comparés aux limites admissibles de contamination microbienne de l'air d'un local donné selon les tableaux correspondants : « classification des locaux industriels selon la teneur admissible en microorganismes et particules mécaniques dans l'air pour la fabrication de produits stériles » et "classement des locaux pour la production de produits non stériles médicaments en balançant le nombre admissible de particules et de micro-organismes dans l'air.
Calcul du volume total minimum d'échantillon d'airà chaque point de contrôle est effectuée conformément aux des lignes directrices sur le contrôle de la teneur en micro-organismes et particules dans l'air des locaux industriels (Arrêté du ministère de la Santé de l'Ukraine du 14 décembre 2001 n° 502).
Au début des années 1960, V.F. Krotov a développé une nouvelle méthode pour résoudre les problèmes variationnels, qui est basée sur une condition d'optimalité suffisante, qui fut plus tard appelée principe d'optimalité de Krotov. Mais avant de nous familiariser avec ce principe, considérons une formulation plus générale du problème contrôle optimal.
La solution au problème de contrôle optimal dans la classe des contrôles continus par morceaux et des trajectoires lisses par morceaux n'existe pas toujours. Il est conseillé de le généraliser de manière à élargir la classe des problèmes de contrôle optimal qui ont une solution.
Soit l'objet, les contraintes et les conditions aux limites spécifiés comme suit :
Ici, pour chaque fixe, est un ensemble d'espace. On désigne par l'ensemble des couples de fonctions continues par morceaux et de fonctions lisses par morceaux (continues et dérivables par morceaux) définies sur et satisfaisant l'équation sur cet intervalle, à un nombre fini de points près, la contrainte sur l'ensemble de l'intervalle et les conditions aux limites (10.70 ). L'ensemble est dit admissible
ensemble, et ses éléments sont des paires admissibles, et l'ensemble reçoit la fonction
Il faut trouver une suite de couples admissibles sur lesquels la fonctionnelle (10.71) tend vers sa la plus petite valeur sur le plateau
Une telle séquence est appelée minimisation. Une séquence de paires admissibles sera également appelée séquence admissible.
Le principal point de généralisation dans le nouveau cadre est qu'une séquence de minimisation est considérée comme une solution au problème de contrôle optimal, plutôt qu'une paire admissible définie. Dans le cas particulier, lorsqu'il existe une paire admissible qui minimise la fonctionnelle (10.71), tous les membres de la séquence de minimisation sont égaux à cette paire :.
Exemple 10.12. Considérons un exemple légèrement modifié de Bolz 11] :
La plus petite valeur (inférieure exacte) de la fonctionnelle est égale à zéro et est atteinte sur la séquence