Među čimbenicima okoliša koji utječu na ljudski život, zrak zauzima vodeće mjesto. Znanost koja proučava mikrofloru zraka naziva se aeromikrobologija.
Zrak nije povoljno okruženje za razvoj mikroorganizama, budući da ne sadrži hranjivim tvarima i u stalnom je kretanju. Stoga većina mikroorganizama brzo nestaje iz zraka. Međutim, neki od njih su stabilniji, na primjer, bacil tuberkuloze, spore klostridije, gljivice i drugi, i mogu dugo ostati u zraku.
U zraku gradova ima više mikroorganizama nego u zraku šuma i polja.
Broj mikroorganizama u zraku opada s visinom. Na primjer, na nadmorskoj visini od 500 m iznad Moskve, 2-3 bakterije nalaze se u 1 m 3 zraka, a na nadmorskoj visini od 1000 m - upola manje.
Broj mikroorganizama u zatvorenim prostorima obično je veći nego u zraku otvorenih prostora.
GOST ne standardizira metode za provođenje ispitivanja zraka. Ranije se velika pažnja posvećivala identifikaciji hemolitičkih streptokoka kao pokazatelja onečišćenja zraka zatvorene prostorije mikroflore koja se nalazi u ljudskom nazofarinksu. Trenutačno se više pažnje posvećuje izravnoj detekciji patogenih i oportunističkih mikroorganizama u zraku.
Sanitarna i bakteriološka ispitivanja zraka provode se prema planu: u bolnicama, operacijskim salama, dječjim ustanovama itd.
Tijekom sanitarne i bakteriološke studije utvrđuje se sljedeće:
1. Ukupan broj bakterija u 1 m 3 zraka.
2. Prisutnost patogenih i uvjetno patogenih mikroorganizama u 1 m 3 zraka.
Detekcija mikroorganizama u zraku provodi se posebnim instrumentima i posebnim podlogama (dijagnostička i diferencijalna dijagnostika).
Metode uzorkovanja zraka
Dvije su glavne metode uzimanja uzoraka zraka za istraživanje: 1) sedimentacija – temelji se na mehaničkom taloženju mikroorganizama; 2) aspiracija - na temelju aktivnog usisavanja zraka (ova metoda omogućuje određivanje ne samo kvalitativnog, već i kvantitativnog sadržaja bakterija).
Metoda taloženja
Stavljaju se Petrijeve zdjelice s hranjivim medijem (MPA). otvorena forma vodoravno, na različitim razinama od poda. Metoda se temelji na mehaničkom taloženju bakterija na površini agara u Petrijevim zdjelicama. Čašice s medijem izlažu se 10 do 20 minuta, ovisno o očekivanom onečišćenju zraka. Za identifikaciju patogene flore koriste se selektivni mediji. Izlaganje se u tim slučajevima produljuje na 2-3 sata. Nakon izlaganja, posude se zatvore, odnesu u laboratorij i stave u termostat na 24 sata na temperaturi od 37 °C. Sljedeći dan se proučavaju uzgojene kolonije. . Ova metoda se uglavnom koristi u zatvorenim prostorima.
(Metoda aspiracije )
Zamka za bakterije Rechmensky. Prije upotrebe uređaj se napuni sterilnom sodom. Rad uređaja temelji se na provlačenju zraka kroz njega pomoću aspiratora. U tom slučaju, tekućina u uređaju se raspršuje. Nakon završetka usisavanja tekućina kroz koju je prošao zrak inokulira se s 0,1-0,2 ml po MPA u Petrijeve zdjelice. Ako je potrebno koristiti selektivne medije, doza sjemena se povećava (0,3-0,5 ml). Tekućina dobivena u prijemniku može se koristiti za zarazu životinja (na primjer, u studijama koje se provode za identifikaciju virusa, rikecija itd.).
Dyakonovljev uređaj također se temelji na hvatanju bakterija u tekućini kroz koju prolazi zrak.
Uređaj PAB-1 namijenjen je bakteriološkom istraživanju velikih količina zraka u kratkom vremenu. Uzorci zraka dobivaju se pri brzini od 125-150 l/min. Princip rada uređaja temelji se na hvatanju mikroorganizama na elektrodu suprotnog naboja. Velika brzina uzorkovanja zraka u ovom uređaju i mogućnost inokulacije na različite hranjive podloge važna je za detekciju patogenih i oportunističkih bakterija (npr. Pseudomonas aeruginosa na kirurškim odjelima i dr.).
Krotovljev aparat. Djelovanje se temelji na principu udara mlaza zraka u medij u Petrijevim zdjelicama. Uređaj se sastoji od tri dijela: jedinice za uzorkovanje zraka, rotametra i električnog dijela mehanizma za napajanje.
Pomoću centrifugalnog ventilatora koji se okreće brzinom od 4000-5000 okretaja u minuti, ispitivani zrak se usisava u utor uređaja i s medijem udara o površinu otvorene Petrijeve zdjelice. Mikroorganizmi sadržani u zraku talože se na hranjivom agaru. Kako bi se mikroorganizmi ravnomjerno rasporedili po cijeloj površini, stolić sa šalicom na njemu se okreće. Zrak se uklanja iz uređaja kroz zračnu cijev koja je spojena na rotametar koji pokazuje brzinu zraka koji prolazi kroz uređaj.
Nedostatak Krotovljevog uređaja je što zahtijeva struju, pa se ne može koristiti u svim uvjetima.
Prvi dan studija
Odabrani uzorci stavljaju se u termostat na 37°C 18-24 sata.
Drugi dan studija
Posuda se izvadi iz termostata i izbroje se kolonije. Bakterijska onečišćenost zraka izražava se ukupnim brojem mikroba u 1 m 3 zraka.
Kalkulacija. Na primjer, u 10 minuta prošlo je 125 litara zraka, a na površini je izraslo 100 kolonija.
Da bi se odredio Staphylococcus aureus, uzorak se skuplja na agaru žumanjka i soli. Inokulirane posude se inkubiraju u termostatu na 37°C 24 sata i drže na sobna temperatura za prepoznavanje pigmenta. Kolonije za koje se sumnja da su S. aureus treba dalje identificirati (vidi Poglavlje 14).
U dječjim ustanovama zrak se provjerava na prisutnost salmonele. Da bi se to postiglo, zrak se inokulira u posudu s medijem bizmut-sulfit agar.
Detekcija patogenih bakterija i virusa u zraku zatvorenih prostora provodi se prema epidemiološkim indikacijama. Za identifikaciju uzročnika tuberkuloze koristi se POV uređaj; kao medij za hvatanje koristi se Shkolnikovin medij.
Kontrolna pitanja
1. Je li zrak povoljna sredina za razvoj mikroorganizama?
2. Koje ustanove provode rutinska istraživanja mikroflore zraka?
3. Opišite strukturu Krotovljevog aparata.
Zadatak
U 10 minuta propušteno je 250 litara zraka. Izraslo je 150 kolonija. Izračunajte broj kolonija u 1 m zraka.
Vježbajte
Uzmite 4 Petrijeve zdjelice s MPA medijem, otvorite ih i postavite na različite razine od poda. Nakon 20 minuta zatvorite šalice i stavite u termostat. Sljedeći dan izbrojite kolonije koje su narasle i odredite stupanj onečišćenja zraka.
Velika skupina instrumenata i uređaja namijenjena je koncentriranju mikroorganizama u uzorcima s predmeta vanjsko okruženje(voda, zrak), kao iu uzorcima patološkog materijala bolesnika.
Kao što je poznato, objekti okoliša mogu biti izvor masovnih infekcija ljudi i životinja ako su kontaminirani patogenim mikroorganizmima. Za procjenu prisutnosti patogenih mikroorganizama u objektima okoliša najpouzdaniji kriterij je njihova izravna detekcija. Međutim, metode koje se koriste u mikrobiološkoj praksi ne dopuštaju uvijek to učiniti. Patogene mikroorganizme teško je identificirati u objektima okoliša, budući da ih je mnogo manje od saprofita. Stoga, zbog antagonističkog djelovanja na hranjive podloge, rast patogene flore često biva potisnut rastom saprofita. Primarni zadatak proučavanja okolišnog objekta kao što je zrak je koncentracija mikroorganizama suspendiranih u njemu u maloj količini tekućine (hranjivi medij).
Jedan od vodećih pokazatelja bakterijske kontaminacije okolišnih objekata je pokazatelj mikrobnog broja. Ovi podaci sanitarne mikrobiologije bilježe se brojanjem kolonija koje su rasle na Petrijevim zdjelicama, nakon čega slijedi ponovni izračun.
Značajan broj radova posvećen je metodama uzorkovanja zraka. Predložen je velik broj raznih uređaja za hvatanje bakterijskih aerosola.
Jedan od prvih instrumenata za proučavanje aeromikroflore, koji je uveden u masovnu proizvodnju u našoj zemlji, bio je uređaj Krotov. Unatoč relativno velikom vremenu od početka serijske proizvodnje (pedesete godine), uređaj nije izgubio na značaju u proučavanju sanitarno-bakteriološkog stanja zraka u zatvorenim prostorima i još uvijek se široko koristi u praksi sanitarno-bakteriološke laboratorijima.
Uređaj za bakteriološku analizu zraka(Krotovljev uređaj) (Sl. 58) je cilindar zatvoren poklopcem, ispod kojeg se nalazi stol za postavljanje Petrijeve zdjelice s gustim hranjivim medijem. Unutar cilindra nalazi se elektromotor koji okreće stol sa šalicom i turbina koja kroz prorez na poklopcu usisava zrak u uređaj. Količina usisanog zraka u minuti određena je mjeračem protoka s plovkom i regulirana pomoću ventila. Uređaj se napaja iz mreže 220 V. Dimenzije uređaja u kućištu su 229X200X280 mm. Težina - 8 kg.
Riža. 58. Uređaj za bakteriološku analizu zraka.
1 - ventil rotametra, 2 - rotametar; 3 - brave za kape; 4 - rotirajući disk; 5 - poklopac; 6 - disk; 7 - klinasti razmak; 8 - tijelo; 9 - baza.
Priprema uređaja za rad svodi se na odabir standardnih Petrijevih zdjelica promjera 100 mm i visine 20 mm i njihovo prethodno punjenje hranjivim medijem u količini od 15 ml. Punjenje i hlađenje hranjivih medija provodi se na strogo vodoravnoj površini, sušenje u normalnim uvjetima.
Drugi uređaj slične namjene je uzorkivač zraka POV-1(Sl. 59).
Riža. 59. Uzorkivač zraka POV-1
Uzorci zraka uzimaju se u tekuću hranjivu podlogu, što omogućuje korištenje specifičnih selektivnih podloga i provođenje posebnih (ciljanih) bakterioloških istraživanja.
Tehničke specifikacije uređaj POV-1
Kapacitet............ 20 l/min
AC napajanje..... 127/220 V
Potrošnja energije.........ne više od 18 VA
Dimenzije uređaja........................170x255x285 mm
» polaganje........................170X270X350 »
Težina (sa pakiranjem).................................. ne više od 15 kg
Aspirator za uzorkovanje zraka Model 822, koju proizvodi udruga Krasnogvardeets, namijenjen je analizi nečistoća sadržanih u zraku. Na prednjoj ploči uređaja (Sl. 60) nalaze se: blok za spajanje uređaja na mrežu 1, prekidač za uključivanje i isključivanje uređaja 2, utičnica osigurača 3, istovarni ventil koji štiti električnu motor od preopterećenja pri uzimanju uzoraka zraka pri malim brzinama 4, rotametri (konusne staklene cijevi s plovcima) za određivanje brzine protoka zraka 5, ručke ventila rotametra za podešavanje brzine uzorkovanja 6, vijci za pričvršćivanje ploče na kućište uređaja 7, spojnice za spajanje gumenih cijevi s filtrima 8 i priključkom za uzemljenje uređaja 9.
Riža. 60. Aspirator za uzorkovanje zraka. Objašnjenja u tekstu.
Na sl. 61 prikazano opći oblik aspirator s držačem filtera.
Uzorkovanje se provodi usisavanjem zraka kroz posebne filtre određenom brzinom. Zrak koji prolazi kroz filtere ostavlja za sobom nečistoće koje sadrži. Znajući brzinu zraka i vrijeme prolaska, možete odrediti volumen zraka koji prolazi kroz filter. Određivanjem količine nečistoća na filteru, možete izračunati količinu nečistoća po jedinici volumena zraka.
Aspirator za uzorkovanje zraka proizvodi francuska tvrtka Baudard. Aspirator je zatvoreni aparat s uređajem za ojačavanje filtara s finim porama, koji se nakon usisavanja određenog volumena zraka kroz aspirator lako uklanja i, ovisno o svrsi istraživanja, proučava ili bakteriološki (inkubacija filtra s mikroorganizmima na njemu u hranjivim podlogama) ili mikroskopski (određivanje prirode čestica koje filter zadržava, njihovo brojanje itd.).
Fini porozni filtri koji se koriste mogu biti papirnati ili stakleni. Promjer filtera je 110 mm.
Centrifugalni ventilator ima dvije brzine i namijenjen je za napajanje iz mrežnog napona 220 V; snaga motora - 50 W; produktivnost aspiratora - od 360 do 1000 l / min, ovisno o otporu korištenog filtera s finim porama.
Pri proučavanju vode i drugih okolišnih objekata (tla), kao i bioloških tekućina ljudi i životinja (sputum, eksudati i transudati) na prisutnost patogene flore, kao u proučavanju zraka, preliminarna koncentracija mikroorganizama u malom volumenu potrebna je hranjiva podloga koja se naknadno podvrgava bakteriološkoj pretrazi (mikroskopija, kultura, biokemijske i serološke reakcije itd.).
Riža. 61. Aspirator s držačem filtera.
Međutim, napredak u području metoda za koncentriranje mikroorganizama iz okolišnih objekata je mali, i najvećim dijelom moramo se ograničiti na stare metode koje predstavljaju razne načineštednja:
- taloženje mehaničkim putem- filtracija, centrifugiranje, isparavanje vode;
- taloženje mikroba fizikalnim i kemijskim metodama pomoću različitih koagulansa;
- koncentracija mikroba metodom flotacije;
- taloženje mikroba specifičnim aglutinirajućim serumima;
- korištenje kombiniranih metoda za koncentriranje mikroorganizama, koje se sastoje od kombinacije metoda taloženja s naknadnim nasađivanjem na hranjivim podlogama ili infekcijom osjetljive laboratorijske životinje.
Nove metode koncentriranja mikroorganizama temelje se na primjeni određenih fizikalnih principa. Jedan takav fizikalni princip je elektroforeza. Korištenje ove metode osigurava kretanje mikrobne stanice prema jednoj od elektroda smještenih u tekućem mediju pod utjecajem vanjske elektromotorne sile (EMS) koja se primjenjuje na elektrode. Ovaj princip čini osnovu uređaja EFM-1 (slika 62). Uređaj vam omogućuje koncentriranje mikrobnih stanica s pozitivnim ili negativnim površinskim nabojem u malom volumenu izolirane tekućine (0,01-0,02 ml).
Riža. 62. Uređaj za elektroforezu mikobakterija EFM-1.
Osim za ispitivanje vode, uređaj se može koristiti za bakteriološka ispitivanja vodenih suspenzija prehrambenih proizvoda, raznih pranja i sl. Uređaj se također može koristiti za detekciju mikroorganizama u raznih materijala, dobivenih od pacijenata, posebno za detekciju Mycobacterium tuberculosis u materijalima kao što su cerebrospinalna tekućina, ispiranje bronha i želuca, sve vrste punktata i urin. U razmazima pripremljenim iz suspenzije Mycobacterium tuberculosis u fiziološkoj otopini i podvrgnutim elektroforetskom koncentriranju, broj mikrobnih stanica se povećava 10-15 puta u odnosu na razmaze iz nativnog materijala.
Uređaj je opremljen setom pribora koji uključuje 20 nesalomljivih kiveta kapaciteta 12 ml, elektrode i pipete. Uređaj se napaja izmjeničnim naponom od 220 V± 10%, 50 Hz. Potrošnja energije - ne više od 20 W. Dimenzije - 405X165X205 mm. Težina uređaja sa setom pribora je 6 kg.
Princip rada uređaja. 10 ml ispitivanog materijala ulijeva se u posebne kivete koje se isporučuju uz uređaj. Iznad svake kivete stezaljkom-držačem pričvršćena je pipeta u kojoj je postavljena grafitna elektroda. Dio tekućine koja se ispituje diže se 4-5 mm duž kapilare pipete i dodiruje elektrodu. Ovisno o svrsi studije, utvrđuje se polaritet primijenjenog EMF-a. Elektroforezu je preporučljivo provoditi 1-3 sata.
Nakon isključivanja struje tekućina iz kapilare se gumenim balonom istisne u kap seruma (normalni konjski ili zečji serum razrijeđen u omjeru 1:10), prethodno nanesen na površinu predmetnog stakla, te dobro pomiješan s zatvorenom Pasteurovom pipetom, preparat se osuši, fiksira iznad plamena plamenika i boji po Gramu, Ziehl-Nielsenu ili nekom drugom metodom.
Kako bi se uklonila mogućnost dijagnostičkih pogrešaka, sve se manipulacije provode pažljivo obrađenim kivetama, pipetama i stakalcima. Grafitne elektrode moraju se promijeniti nakon svake studije.
Otopine boja i kiselina moraju se pažljivo bakteriološki ispitati.
Kako bi se povećala točnost brojanja izraslih mikrobnih kolonija, Kijevska tvornica medicinske opreme proizvodi uređaj za brojanje bakterijskih kolonija. Za brojanje kolonija električnom olovkom, točke su označene na dnu čašice na mjestu svake kolonije, dok su kontakti električne olovke zatvoreni i električni puls koji dolazi na brojač proizvodi brojanje. Izgled Uređaj je prikazan na sl. 63.
Riža. 63. Uređaj za brojanje kolonija.
Za brojanje kolonija na zatvorenoj zdjelici olovkom ili perom se označava poleđina zdjelice, čime se eliminira mogućnost dvaputa brojanja iste kolonije.
Univerzalni brojač za brojanje kolonija na hranjivoj podlozi Bactronic opremljen elektroničkim vrhom za brojanje broja kolonija na otvorenim pločama. U kontaktu s bilo kojim agar medijem, vrh aktivira elektromagnetski mehanizam za brojanje i ostavlja trag na površini medija.
Ovaj uređaj eliminira električna pražnjenja do kojih dolazi pri korištenju drugih sustava.
Kod brojanja kolonija na pločicama s rijetkim rastom možete koristiti tipku na instrument ploči, a po potrebi i daljinski prekidač koji olakšava rad.
Tvrtka Millipore proizvodi poseban kofer za mikrobiološka istraživanja. Kovčeg, koji je u biti prijenosni laboratorij (Sl. 64), pruža sve potrebne materijale i oprema za istraživanje bakterijske kontaminacije vode, detekciju mikroorganizama u zraku i tlu, praćenje temperature i rasta bakterija, identifikaciju kvasnih gljivica u okoliš, stvaranje plina od kvasaca, određivanje učinkovitosti dezinfekcijskih sredstava itd.
Riža. 64. Kutija za skladištenje mikrobioloških studija.
Za utvrđivanje kakvoće prehrambenih proizvoda izdaje se luminoskop LPK-1. Uz njegovu pomoć možete odrediti vrstu mesa, rano kvarenje svinjskog mesa i svinjske masti, omjer komponente mljevenog mesa, pregled jestivih ulja, masti, meda i drugih proizvoda (slika 65).
Uređaj koristi princip vizualne luminiscentne analize. Pod utjecajem ultraljubičastih zraka prehrambeni proizvodi Ovisno o svojstvima i kvaliteti, počinju svijetliti različitim bojama, a svjetlosni filtri ističu odgovarajuće dijelove spektra. Prilikom rada s uređajem nema potrebe za zamračivanjem prostorije, istraživač je zaštićen od izlaganja ultraljubičastim zrakama.
Način rada uređaja je isprekidan. Radno vrijeme - 1 sat, pauza - 25 minuta. Istraživanje proizvoda ne traje više od 1 minute. Uređaj se napaja iz AC mreže - 220 V±10%. Potrošnja energije - ne više od 350 W. dimenzije- 366X185X240 mm. Težina - 6 kg.
Riža. 65. Uređaj za određivanje kakvoće proizvoda LPK-1.
1.1 Opće odredbe.
Organizacija mora planirati i razviti procese potrebne za stvaranje sigurnih proizvoda.
Organizacija će provoditi, implementirati i osigurati učinkovitost planiranih aktivnosti i svih njihovih promjena. To uključuje plan upravljanja sigurnošću, kao i operativni plan upravljanja sigurnošću i/ili HACCP plan.
1.2Osnovni programi (BPR).
1.2.1 Organizacija mora uspostaviti, implementirati i održavati osnovne programe (BP) za upravljanje:
a) vjerojatnost unošenja čimbenika koji uzrokuju opasnost za prehrambeni proizvod u proizvod kroz radnu okolinu,
b) biološku, kemijsku i fizičku kontaminaciju proizvoda(a), uključujući unakrsnu kontaminaciju između proizvoda, i
c) razine opasnosti u proizvodu i okolini u kojoj se obrađuje.
1.2.2 BDP mora:
a) zadovoljiti potrebe organizacije u vezi sa sigurnošću hrane,
b) odgovara opsegu i vrsti proizvodnje i prirodi proizvedenih i/ili prerađenih proizvoda,
c) biti ugrađen u mrežu unutarnji sustav proizvodnje, kao programi koji se koriste univerzalno, ili kao programi primijenjeni na određeni proizvod ili proizvodna linija, I
d) biti odobren od strane skupine za sigurnost hrane.
Organizacija mora identificirati zakonske i zakonske zahtjeve relevantne za gore navedeno.
1.2.3 Prilikom odabira i/ili uspostavljanja PBP-ova, organizacija će uzeti u obzir i koristiti relevantne informacije [npr. zakonske i zakonske zahtjeve, zahtjeve kupaca, priznate smjernice, načela Komisije za Codex Alimentarius (Kodeks), kodekse prakse, nacionalne, međunarodne ili industrijske standarde. ].
BILJEŠKA. Dodatak C daje popis relevantnih publikacija Codexa.
Prilikom uspostavljanja ovih programa, organizacija treba uzeti u obzir sljedeće:
a) dizajn i raspored zgrada i povezanih usluga;
d) raspored prostorija, uključujući radna mjesta i pomoćne prostore za radnike;
c) opskrbu zrakom, vodom, električnom energijom i druge komunalne usluge;
d) pomoćne usluge, uključujući zbrinjavanje otpada i Otpadne vode;
f) prikladnost opreme i njezina pristupačnost za čišćenje, održavanje i preventivno održavanje;
f) upravljanje nabavljenim materijalima (na primjer: sirovine, sastojci, kemikalije i ambalaža), opskrba (na primjer: voda, zrak, para i led), odlaganje (na primjer: otpad i otpadne vode) i rukovanje proizvodom (na primjer : skladištenje i transport);
g) mjere za sprječavanje unakrsne kontaminacije;
h) čišćenje i sanitacija;
i) suzbijanje štetočina;
j) higijena osoblja;
k) druge relevantne aspekte.
Treba planirati provjeru FDP-a (vidi 1.8), a FBP treba modificirati ako je potrebno (vidi 1.1). Moraju se održavati zapisi o provjerama i izmjenama.
Dokumenti trebaju opisivati kako se upravlja aktivnostima uključenim u financijski izvještaj.
1.3 Preliminarni koraci za analizu opasnosti.
1.3.1 Opće odredbe.
Sve informacije potrebne za provođenje analize opasnosti moraju se prikupljati, održavati, ažurirati i dokumentirati. Zapisi se moraju voditi.
1.3.2 Grupa za sigurnost hrane.
Mora se imenovati tim za sigurnost hrane.
Tim za sigurnost hrane mora imati multidisciplinarno znanje i iskustvo u razvoju i implementaciji sustava sigurnosti hrane. To uključuje, ali nije ograničeno na, znanje o proizvodu organizacije, procesima, opremi i opasnostima u hrani u okviru sustava sigurnosti hrane.
Moraju se voditi evidencije kako bi se pokazalo da grupa ima potrebno znanje i iskustvo (vidi 6.2.2).
1.3.3 Karakteristike proizvoda.
1.3.3.1 Sirovine, sastojci i materijali u dodiru s proizvodima.
Sve sirovine, sastojci i materijali u dodiru s proizvodima moraju biti dokumentirani u mjeri potrebnoj za provođenje analize opasnosti (vidi 1.4), uključujući sljedeće, ako je primjenjivo:
a) biološka, kemijska i fizikalna svojstva,
b) sastav sastojaka recepture, uključujući aditive i tehnološka pomagala,
c) porijeklo,
d) način proizvodnje,
f) načine pakiranja i dostave,
f) uvjete skladištenja i rok valjanosti,
g) pripremu i/ili rukovanje prije upotrebe ili obrade,
h) kriterije prihvatljivosti koji se odnose na sigurnost hrane ili specifikacije kupljenih materijala i sastojaka prema njihovoj namjeni.
Organizacija mora utvrditi zakonske i zakonske zahtjeve za sigurnost hrane relevantne za gore navedeno.
1.3.3.2 Karakteristike konačnog proizvoda.
Značajke gotovih proizvoda moraju se dokumentirati u mjeri potrebnoj za podršku analizi opasnosti (vidi 1.4), uključujući sljedeće informacije, ako je primjenjivo:
a) naziv proizvoda ili drugu identifikaciju,
b) sastav,
c) biološka, kemijska i fizikalna svojstva bitna za sigurnost hrane,
d) utvrđen rok valjanosti i uvjete skladištenja,
e) pakiranje,
f) označavanje sigurnosti hrane i/ili upute za rukovanje, pripremu i uporabu,
g) metoda(e) distribucije.
Organizacija mora utvrditi zakonske i zakonske zahtjeve za sigurnost hrane relevantne za gore navedeno.
Opisi se moraju ažurirati, uključujući, ako je potrebno, odredbe stavka 1.1.
1.3.4 Namjena.
Namjena, razumno očekivano rukovanje krajnjim proizvodom i svako nenamjerno, ali razumno predvidljivo pogrešno rukovanje i zlouporaba krajnjeg proizvoda moraju se pregledati i dokumentirati u mjeri u kojoj se može provesti analiza opasnosti (vidi 1.4.).
Skupine korisnika i, prema potrebi, skupine potrošača, treba identificirati za svaki proizvod, te treba uzeti u obzir posebno ranjive skupine potrošača na određene opasnosti.
Opisi se moraju ažurirati, uključujući, ako je potrebno, odredbe stavka 1.1.
1.3.5 Dijagrami slijeda, koraci procesa i kontrole.
1.3.5.1 Dijagrami sekvenci.
Dijagrame toka treba pripremiti za kategorije proizvoda ili procesa obuhvaćene sustavom upravljanja sigurnošću hrane. Dijagrami sekvenci trebali bi činiti osnovu za evaluaciju mogući izgled, povećanje ili uvođenje čimbenika koji uzrokuju opasnosti za hranu.
Dijagrami toka moraju biti jasni, precizni i dovoljno detaljni.
Dijagrami slijeda trebaju uključivati sljedeće, ako je primjenjivo:
a) slijed i međudjelovanje svih faza u proizvodnji,
b) sve procese koje provode treće strane i podugovoreni rad,
c) gdje se proizvode sirovine, sastojci i međuproizvodi,
d) gdje dolazi do prerade i ponovne upotrebe,
f) gdje se ispuštaju ili odlažu konačni ili međuproizvodi, kao i nusproizvodi i otpad,
U skladu sa stavkom 1.8, tim za sigurnost hrane mora provjeriti točnost trenutnog dijagrama na licu mjesta. Potvrđeni sekvencijski dijagrami trebaju se održavati kao zapisi.
1.3.5.2 Opis koraka procesa i kontrola.
Postojeće kontrole, parametri procesa i/ili preciznost s kojom se izvode ili postupci koji utječu na sigurnost hrane trebaju biti opisani u mjeri potrebnoj za analizu opasnosti (vidi 1.4).
Treba također opisati vanjske zahtjeve (npr. zakonodavci ili kupci) koji mogu utjecati na odabir i točnost kontrolnih mjera.
Opisi se moraju ažurirati, uključujući, ako je potrebno, odredbe stavka 1.1.
1.4 Analiza opasnosti.
1.4.1 Opće odredbe.
Tim za sigurnost hrane mora provesti analizu opasnosti kako bi odredio koje opasnosti treba kontrolirati, opseg kontrole kako bi se osigurala sigurnost hrane i koji je skup kontrola potreban.
1.4.2 Identifikacija opasnosti i uspostavljanje prihvatljivih razina.
1.4.2.1 Sve opasnosti za koje je razumno vjerojatno da će se pojaviti ovisno o vrsti proizvoda, vrsti procesa i stvarnom proizvodni prostori, moraju biti identificirani i registrirani. Identifikacija se mora temeljiti na:
a) preliminarne informacije i podatke prikupljene u skladu s točkom 1.3.,
b) iskustvo,
c) vanjske informacije, uključujući što više epidemioloških i drugih povijesnih podataka, i
d) informacije o sigurnosti hrane dobivene kroz lanac proizvodnje hrane, a koje mogu biti relevantne za sigurnost finalnih ili međuproizvoda i hrane kada se konzumiraju.
Svaka faza (od sirovina, proizvodnje do distribucije) u kojoj se može uvesti bilo koji čimbenik koji uzrokuje opasnost od hrane mora biti specificiran.
1.4.2.2 Prilikom utvrđivanja opasnosti mora se uzeti u obzir sljedeće:
a) faze koje prethode i slijede dotičnu operaciju,
b) tehnološka oprema, usluge i okoliš, i
c) uzvodne i nizvodne karike u lancu proizvodnje hrane.
1.4.2.3 Za svaku identificiranu opasnost od hrane mora se utvrditi prihvatljiva razina opasnosti u konačnom proizvodu, kad god je to moguće.
Pri utvrđivanju ove razine treba uzeti u obzir zakonske i zakonske zahtjeve, zahtjeve kupaca za sigurnošću hrane, namjenu kupca i druge relevantne podatke.
Valjanost i rezultati određivanja moraju se zabilježiti.
1.4.3 Procjena opasnosti.
Mora se provesti procjena opasnosti kako bi se utvrdilo, za svaku opasnost od hrane (vidi 1.4.2), je li njeno uklanjanje ili smanjenje na prihvatljive razine ključno za proizvodnju sigurne hrane i, ako je kontrolirano, potrebno kako bi se osiguralo da su identificirane prihvatljive razine postignuto.
Svaka opasnost od hrane mora se procijeniti prema potencijalnoj težini štetnog učinka na zdravlje i vjerojatnosti njegovog nastanka.
Treba opisati korištenu metodologiju i zabilježiti rezultate procjene opasnosti.
1.4.4 Odabir i procjena kontrolnih mjera.
Na temelju procjene opasnosti prema točki 1.4.3 mora se odabrati odgovarajući skup kontrolnih mjera koje će moći spriječiti, ukloniti ili smanjiti čimbenike koji uzrokuju opasnost za prehrambene proizvode na određene prihvatljive razine.
Uz ovaj izbor, svaka mjera kontrole prema stavku 1.3.5.2 mora se analizirati uzimajući u obzir njezinu učinkovitost u odnosu na identificirane opasnosti.
Odabrane kontrolne mjere moraju biti rangirane (ocijenjene) s obzirom na potrebu za njihovom kontrolom pomoću operativnog plana upravljanja ili HACCP plana.
Odabir i rangiranje mjera trebalo bi izvršiti korištenjem logičkog pristupa, uključujući procjenu uzimajući u obzir sljedeće:
a) njegov učinak na identificirane opasnosti u odnosu na utvrđenu točnost,
b) izvedivost njegovog praćenja (npr. mogućnost redovitog praćenja kako bi se osigurala neposredna korekcija);
c) njegovo mjesto unutar sustava u odnosu na druge kontrole;
d) vjerojatnost neuspjeha kontrole ili značajne varijabilnosti procesa;
f) težinu posljedica u slučaju neispravnosti njegovog rada;
f) je li kontrolna mjera uspostavljena i primijenjena posebno za uklanjanje ili značajno smanjenje razine opasnosti(a);
g) sinergijski učinci (odnosno interakcija koja se javlja između dviju ili više kontrolnih mjera, zbog čega konačni rezultat premašuje zbroj njihovih pojedinačnih rezultata).
Kontrolne mjere rangirane kao relevantne za HACCP plan moraju se provoditi u skladu s točkom 1.6. Ostale mjere upravljanja moraju se provoditi kao operativni BDP-ovi u skladu s točkom 1.5.
Metodologija i parametri korišteni za ovo rangiranje moraju se dokumentirati, a rezultati ocjenjivanja moraju se zabilježiti.
1.5 Uspostavljanje operativnih osnovnih programa (OBP).
Operativni BPR-ovi moraju biti dokumentirani i moraju sadržavati sljedeće informacije za svaki program:
a) čimbenik(-e) koji uzrokuje opasnosti od hrane koje kontrolira program (vidi klauzulu 1.4.4.),
b) mjere kontrole (vidi stavak 1.4.4.),
c) postupke praćenja koji pokazuju provedbu operativnog plana upravljanja;
d) ispravke i korektivne radnje poduzete u slučaju otkrivanja gubitka kontrole tijekom praćenja operativnog BDP-a (vidjeti klauzulu 1.10.1 odnosno klauzulu 1.10.2.),
f) odgovornosti i ovlasti,
f) evidenciju praćenja.
1.6 Uspostava HACCP plana.
1.6.1 HACCP plan.
HACCP plan mora biti dokumentiran i mora uključivati sljedeće informacije za svaku kritičnu kontrolnu točku (CCP):
a) čimbenicima koji uzrokuju opasnost za prehrambene proizvode mora se upravljati u CTU-u (vidi klauzulu 1.4.4.),
b) mjere kontrole (vidi stavak 1.4.4.),
c) kritične granice (vidi klauzulu 1.6.3.)
d) postupak(e) praćenja (vidi 1.6.4),
f) ispravke i korektivne radnje koje treba poduzeti ako se prekorače kritične granice (vidi 1.6.5);
f) odgovornosti i ovlasti;
g) evidenciju praćenja.
1.6.2 Identifikacija kritičnih kontrolnih točaka (CCP).
Za svaku opasnost koja se kontrolira prema HACCP planu moraju se identificirati KTU za identificirane mjere kontrole (vidi stavak 1.4.4.).
1.6.3 Određivanje kritičnih granica za kritične kontrolne točke.
Moraju se odrediti kritične granice za nadzor uspostavljen za svaku CTU.
Moraju se uspostaviti kritične granice kako bi se osiguralo da utvrđena prihvatljiva razina opasnosti u konačnom proizvodu (vidi 1.4.2.) nije prekoračena.
Kritične granice moraju biti mjerljive.
Obrazloženje za odabrane kritične granice treba biti dokumentirano.
Kritična ograničenja temeljena na subjektivnim podacima (kao što je vizualni pregled proizvoda, procesa, tretmana itd.) moraju biti potkrijepljena uputama ili specifikacijama i/ili obrazovanjem i obukom.
1.6.4 Sustav praćenja kritičnih kontrolnih točaka.
Za svaku CTU treba instalirati sustav nadzora kako bi se pokazalo da je CTU pod kontrolom. Ovaj sustav uključuje sva planirana mjerenja ili promatranja u vezi s kritičnim granicama.
Sustav praćenja trebao bi se sastojati od odgovarajućih postupaka, uputa i zapisa koji pokrivaju sljedeće:
a) mjerenja ili opažanja koja daju rezultate u odgovarajućem vremenskom okviru,
b) korišteni nadzorni uređaji,
c) korištene metode umjeravanja (vidi 8.3);
d) učestalost praćenja;
f) odgovornosti i ovlasti u vezi s praćenjem i vrednovanjem rezultata praćenja;
f) zahtjeve za evidenciju i metode vođenja evidencije
Metode i učestalost praćenja moraju moći otkriti kada su kritične razine prekoračene na vrijeme, kako bi se proizvod izolirao prije nego što se upotrijebi ili konzumira.
1.6.5 Radnje koje se poduzimaju kada se prekorače kritične granice na temelju rezultata praćenja.
Planirane korekcije i korektivne radnje poduzete kada se prekorače kritične granice moraju biti opisane u HACCP planu. Ove radnje trebaju osigurati da se utvrdi uzrok nesukladnosti, da se parametri kontrolirani u upravljačkoj jedinici ponovno stave pod kontrolu i da se spriječi ponavljanje nesukladnosti (vidi klauzulu 1.10.2).
Potrebno je uspostaviti i slijediti dokumentirane postupke kako bi se osiguralo odgovarajuće postupanje s potencijalom opasne proizvode i osigurati da do njihovog puštanja ne dođe bez njihove preliminarne procjene (vidi klauzulu 1.10.3).
1.7 Ažuriranje preliminarnih informacija i dokumenata koji opisuju BPR i HACCP plan.
Nakon odobrenja operativnog plana upravljanja sigurnošću (vidi klauzulu 1.5) i/ili HACCP plana (vidi klauzulu 1.6), organizacija mora ažurirati sljedeće informacije, ako je potrebno:
a) karakteristike proizvoda (vidi klauzulu 1.3.3);
b) namjeravanu uporabu (vidi klauzulu 1.3.4);
c) sekvencijski dijagrami (vidi 1.5.5.1);
d) korake procesa (vidi 1.3.5.2);
f) mjere kontrole (vidi klauzulu 1.3.5.2).
Ako je potrebno, potrebno je izvršiti izmjene u HACCP planu (vidi točku 1.6.1), te u postupcima i uputama koje opisuju sigurnosne mjere (vidi točku 1.2).
1.8 Planiranje verifikacije.
Prilikom planiranja verifikacije moraju se odrediti ciljevi, metode, učestalost i odgovornosti za provođenje verifikacije. Aktivnosti verifikacije trebaju potvrditi da:
a) BDP se provode (vidi klauzulu 1.2),
b) ulazni podaci za analizu opasnosti (vidi klauzulu 1.3) kontinuirano se ažuriraju,
c) operativni planovi upravljanja sigurnošću (vidi klauzulu 1.5) i elementi unutar HACCP plana (vidi klauzulu 1.6.1) su implementirani i učinkoviti,
d) razine opasnosti su unutar prihvatljivih razina (vidi 1.4.2), i
f) da su drugi postupci koje zahtijeva organizacija implementirani i učinkoviti.
Izlaz ovog planiranja mora biti u obliku primjerenom metodama funkcioniranja organizacije.
Rezultati provjere moraju se zabilježiti i prijaviti timu za sigurnost hrane.
Rezultati verifikacije moraju se pružiti kao podrška analizi rezultata aktivnosti verifikacije (vidi klauzulu 8.4.3).
Ako se sustav provjere temelji na testiranju uzoraka konačnog proizvoda i ako takvo ispitivanje uzoraka otkrije nesukladnost s prihvatljivom razinom opasnosti (vidi 1.4.2), relevantne serije proizvoda moraju se tretirati kao potencijalno opasne u skladu s 1.10.3.
1.9Sustav sljedivosti.
Organizacija mora uspostaviti i održavati sustav sljedivosti koji osigurava identifikaciju serija proizvoda u odnosu na serije sirovina, evidenciju o proizvodnji i opskrbi.
Sustav sljedivosti mora moći identificirati dolazni materijal od izravnog dobavljača i početni put distribucije konačnog proizvoda.
Zapisi o sljedivosti moraju se održavati određeno razdoblje kako bi se procijenio sustav kako bi se osiguralo rukovanje potencijalno opasnim proizvodima i u slučaju povlačenja proizvoda. Zapisi se trebaju održavati u skladu sa zakonskim, zakonskim i zahtjevima kupaca i mogu se, na primjer, temeljiti na identifikaciji serije konačnog proizvoda.
1.10 Upravljanje nesukladnostima.
1.10.1 Ispravci.
Organizacija mora osigurati da se, u slučaju prekoračenja kritične granice za CTU (vidi 1.6.5), ili gubitka kontrole nad operativnim BDP-ima, pogođeni proizvodi identificiraju i kontroliraju, uzimajući u obzir njihovu upotrebu i puštanje u promet.
Mora se uspostaviti i slijediti dokumentirana procedura. Trebalo bi definirati:
a) identificiranje i procjena zahvaćenih krajnjih proizvoda kako bi se odredilo njihovo odgovarajuće rukovanje (vidi 1.10.3), i
b) analiza izvršenih korekcija.
Proizvodi proizvedeni u uvjetima u kojima su prekoračene kritične razine potencijalno su opasni i njima se mora rukovati u skladu s točkom 1.10.3. Proizvodi proizvedeni u nesukladnosti s operativnim sigurnosnim propisima moraju se ocijeniti s obzirom na uzroke nesukladnosti i njihove posljedice na sigurnost hrane i, prema potrebi, s njima treba postupati u skladu s 1.10.3. Procjena se mora zabilježiti.
Sve korekcije moraju biti odobrene odgovorna osoba(od strane osoba) i treba ih zabilježiti zajedno s informacijama o prirodi nesukladnosti, njihovim uzrocima i posljedicama, uključujući informacije potrebne za sljedivost u vezi s nesukladnim serijama.
1.10.2 Korektivne radnje.
Podatke dobivene kao rezultat praćenja operativnih BDP-ova i CTU-ova mora ocijeniti određena osoba(e) s dovoljno znanja (vidi točku 6.2) i ovlasti (vidi točku 5.4) za pokretanje korektivnih radnji.
Moraju se poduzeti korektivne radnje kada se prekorače kritične granice (vidi klauzulu 1.6.5) ili kada postoji nedostatak usklađenosti s operativnim BPR-om.
Organizacija mora uspostaviti i implementirati dokumentirane postupke koji specificiraju odgovarajuće radnje za prepoznavanje i ispravljanje uzroka otkrivenih nesukladnosti, spriječiti njihovo ponavljanje i vratiti proces ili sustav pod kontrolu nakon što se nesukladnost otkrije.
Te radnje uključuju:
a) analizu nesukladnosti (uključujući pritužbe kupaca);
b) analizu trendova u rezultatima praćenja koji mogu ukazivati na razvoj prema gubitku kontrole;
c) utvrđivanje uzroka nesukladnosti,
d) ocjenjivanje radnji potrebnih za sprječavanje ponavljanja nesukladnosti;
f) utvrđivanje i provedba potrebnih radnji;
f) bilježenje rezultata poduzetih korektivnih radnji, i
g) analiza korektivnih radnji poduzetih da se potvrdi njihova učinkovitost.
Korektivne radnje moraju se zabilježiti.
1.10.3 Rukovanje potencijalno opasnim proizvodima.
1.10.3.1 Opće odredbe.
Organizacija mora postupati s nesukladnim proizvodima poduzimanjem mjera za sprječavanje ulaska nesukladnih proizvoda u lanac proizvodnje hrane sve dok se ne uvjeri da:
a) opasnosti od hrane smanjene su na utvrđene prihvatljive razine,
b) dotična opasnost od hrane bit će smanjena na utvrđene prihvatljive razine (vidi 1.4.2) prije ulaska u lanac proizvodnje hrane, ili
c) proizvodi su u skladu s prihvatljivom razinom opasnosti za hranu koja se razmatra, unatoč nesukladnosti.
Sve serije proizvoda na koje utječe nesukladna situacija ostat će pod kontrolom organizacije dok se ne ocijene.
Ako se utvrdi da su proizvodi koji su izgubili kontrolu organizacije opasni, organizacija mora obavijestiti odgovarajuće dionike i pokrenuti povlačenje (vidi 1.10.4).
BILJEŠKA. Pojam "napadaj" uključuje opoziv hrane.
Kontrolne mjere i odgovarajuće reakcije i ovlaštenja za rukovanje potencijalno opasnim proizvodima moraju biti dokumentirani.
1.10.3.2 Evaluacija za puštanje proizvoda u promet.
Svaka serija proizvoda zahvaćena nesukladnošću bit će puštena kao sigurna samo ako je ispunjen jedan od sljedećih uvjeta:
a) dokazi osim sustava praćenja pokazuju da su mjere kontrole bile učinkovite,
b) potvrđeno je da kombinirani učinak kontrolnih mjera za ovog proizvoda ispunjava predviđeni kriterij (tj. utvrđene prihvatljive razine u skladu sa stavkom 1.4.2.);
c) rezultati ispitivanja uzoraka, analize i/ili druge aktivnosti provjere pokazuju da serija proizvoda zahvaćena nesukladnošću zadovoljava utvrđene prihvatljive razine dotičnih opasnosti.
1.10.3.3 Postupanje s nesukladnim proizvodima.
Ako serija proizvoda nije prihvatljiva za puštanje, tada se na njoj mora izvršiti jedna od sljedećih radnji:
a) ponovna obrada ili daljnja obrada, unutar ili izvan organizacije, koja uklanja ili smanjuje opasnost na prihvatljive razine;
b) uništavanje i/ili odlaganje kao otpad.
1.10.4 Povlačenje.
Kako bi se osiguralo i olakšalo potpuno i pravovremeno uklanjanje serija konačnog proizvoda koje su identificirane kao opasne:
a) više rukovodstvo mora imenovati osoblje koje ima ovlasti za pokretanje povlačenja i odrediti odgovorno osoblje za provedbu povlačenja, i
b) organizacija mora uspostaviti i provesti dokumentirani postupak za:
1) obavijesti relevantnim zainteresiranim stranama (na primjer: zakonodavnim i regulatornim tijelima, kupcima i/ili potrošačima),
2) postupanje sa zaplijenjenim proizvodima, kao i opasnim pošiljkama proizvoda koji se još nalaze na skladištu, te
3) uspostavljanje slijeda potrebnih radnji.
Uklanjanje proizvoda mora biti osigurano ili nadzirano dok se ne unište, iskoriste u svrhu koja nije izvorna, dok se ne utvrdi da su sigurni za svoju izvornu namjenu (ili na neki drugi način) ili dok se ne obrade na način koji osigurava da budu sigurni.
Informacije o uzroku, opsegu i učinku povlačenja treba zabilježiti i prijaviti višem rukovodstvu kao ulazne podatke za reviziju menadžmenta (vidi 5.8.2).
Organizacija mora provjeriti i zabilježiti učinkovitost programa povlačenja korištenjem odgovarajućih metoda (npr. simulirano povlačenje ili stvarno povlačenje).
Prilikom uzimanja uzorka zraka za određivanje razine mikrobne kontaminacije potrebno je pridržavati se sljedećih obveznih uvjeta: uzorak zraka uzima se najkasnije 30 minuta nakon čišćenja prostorije, dok prozori i vrata moraju biti zatvoreni, visina uzorka mora odgovarati visini radnog stola. Kontrolu je potrebno provoditi u sterilnoj tehničkoj odjeći od tkanine koja ne ostavlja dlačice i rukavicama.
Prije unošenja uređaja u "čistu" prostoriju, potrebno ga je obrisati krpom koja ne ostavlja dlačice s obrađenim rubovima, navlaženom 76% etilnim alkoholom. Prijenos uređaja u proizvodne prostore klase 1 i 2 i, po mogućnosti, klase 3 čistoće treba se provesti kroz zračnu komoru za materijale. Praćenje čistoće zraka treba provoditi najmanje 2 puta tjedno prije i tijekom procesa proizvodnje na preporučenim mjestima.
Određivanje mikrobnog onečišćenja zraka zatvorenih prostorija metodom taloženje sastoji se od sedimentacije (taloženja) mikroflore (koja se nalazi u zraku), pod utjecajem sile teže, na površini hranjivog medija.
Ova metoda se koristi za približnu procjenu mikrobne kontaminacije zraka u industrijskim prostorima, uglavnom u prostorijama s povećanim onečišćenjem zraka iu slučajevima kada je nemoguće istraživanje aspiracijom (pri upotrebi zapaljivih ili eksplozivnih tvari u proizvodnji).
U industrijskim prostorima kontrola sadržaja mikroorganizama provodi se uglavnom u onim radnim prostorima gdje se nalaze najvjerojatniji izvori mikrobne kontaminacije zraka (mjesta s veliki iznos osoblja, povećani rizik od stvaranja prašine itd.), kao iu područjima gdje se tvari, Pomoćne tvari i gotov proizvod su u izravnom kontaktu s okolinom.
Sjetva se provodi na otvorene Petrijeve zdjelice s mesno-peptonskim agarom (za određivanje broja bakterija) i posebno sa Sabouraudovim agarom (za određivanje broja gljiva). Šalice se postavljaju na nekoliko mjesta u prostorijama: u dugim i uskim - na 4 točke vodoravno na udaljenosti ne većoj od 5 m jedna od druge; u sobama do 15 m2 - u dvije suprotne točke prostorije; više od 100 m2 - u svakoj od 4 suprotne točke iu središtu prostorije. Nakon 10 minuta izlaganja u otvorenom stanju, čašice se zatvore i stave u termostat.
Inokulacije na mesno-peptonskom agaru inkubiraju se na temperaturi od 32,5 ± 2,5 ° C, na Sabouraud agaru - na 22,5 ± 2,5 ° C tijekom 5 dana.
Obračunavanje rezultata istraživanja. Za određivanje ukupnog broja bakterija (gljivica) u 1 m3 zraka, broj izraslih kolonija na posudi pomnoži se s jednim od faktora prikazanih u tablici „Izračun broja mikroorganizama u 1 m3 zraka u 10 min. izloženosti”:
|
Promjer šalice, cm |
Površina šalice, cm2 |
Faktor |
|
Na primjer: 50 kolonija bakterija raslo je na šalici promjera 10 cm. U 1 m3 zraka ukupan broj bakterija je 50 x 60 = 3000.
Međutim, ova metoda ne daje potpunu sliku kvantitativnog sadržaja mikroorganizama. To je zbog činjenice da naseljavanje mikroorganizama ovisi o brzini kretanja zraka, koja se može razlikovati na različitim mjestima u prostoriji. Osim toga, primjenom ove metode slabo se hvataju sitne frakcije bakterijskog aerosola, a kod sjetve jedne čestice aerosola koja sadrži nekoliko održivih mikroorganizama raste samo jedna kolonija, što smanjuje ukupno mikrobno onečišćenje zraka.
Stoga je metoda sedimentacije aproksimativna u procjeni stvarnog stupnja mikrobne kontaminacije zraka u zatvorenom prostoru. Međutim, može poslužiti za utvrđivanje mikrobne kontaminacije zraka tijekom vremena i za procjenu učinkovitosti protuepidemičnih mjera koje se provode.
Određivanje mikrobnog onečišćenja zraka metoda aspiracije provodi se pomoću uzorkivača inercijalnog tipa - impaktora ili uređaja za bakteriološku analizu zraka (Krotovljev prorezni aparat, otuda i drugi naziv za metodu: prorezna metoda za hvatanje bakterija). Rad uređaja temelji se na principu udara mlaza zraka u površinu hranjive podloge koja se nalazi u Petrijevoj zdjelici.
Kod Krotovljevog aparata zrak se usisava kroz klinasti prorez koji se radijalno nalazi iznad Petrijeve zdjelice pomoću centrifugalnog ventilatora. Disk na koji je pričvršćena Petrijeva zdjelica okreće se brzinom od 1 okretaja u sekundi, zbog čega se inokulacija mikroorganizama odvija ravnomjerno po cijeloj površini hranjivog medija.
Mjesto i broj točaka uzorkovanja zraka određuju se ovisno o veličini prostorije (vidi metodu taloženja).
Petrijeva zdjelica s hranjivim medijem postavlja se na disk uređaja, a poklopac se pažljivo zatvara stezaljkama ugrađenim na njegovo tijelo. Uređaj se uključi i reometrom namjesti brzina zraka - 25 ili 40 l/min. U prosjeku se uzorak zraka uzima 5 minuta pri brzini od 40 l/min.
Nakon uzimanja uzorka zraka (sa svake određene točke u dvije paralelne Petrijeve zdjelice s MPA i Sabouraudovim medijem), zdjelice se zatvaraju poklopcima i stavljaju u termostat. Kulturni mediji, temperaturni režim i vrijeme inkubacije usjeva isti su kao kod proučavanja zraka metodom sedimentacije (vidi gore).
Računovodstvo za rezultate. Izračun se provodi prema formuli:
X = a x 1000 / b, gdje je X broj mikroorganizama u 1 m3 zraka; a je broj kolonija koje su izrasle na Petrijevoj zdjelici nakon razdoblja inkubacije; c je volumen uzorka zraka koji se proučava, sveden na normalne uvjete (vidi formulu za smanjenje volumena zraka na normalne uvjete za metodu aspiracije).
Druga metoda izračuna: izbrojite kolonije gljivica i bakterija koje su rasle na paralelnim posudama, odredite aritmetičku sredinu i pomnožite je s 5.
Dobiveni rezultati uspoređuju se s dopuštenim granicama mikrobne kontaminacije zraka pojedine prostorije prema odgovarajućim tablicama: “razvrstavanje proizvodnih prostora prema dopuštenom sadržaju mikroorganizama i mehaničkih čestica u zraku za proizvodnju sterilnih proizvoda” i “razvrstavanje prostora za proizvodnju nesterilnih lijekovi prema dopuštenom broju čestica i mikroorganizama u zraku.”
Izračun najmanjeg ukupnog volumena uzorka zraka na svakoj kontrolnoj točki provodi se u skladu s metodološke preporuke o praćenju sadržaja mikroorganizama i čestica u zraku industrijskih prostora (Naredba Ministarstva zdravstva Ukrajine od 14. prosinca 2001. br. 502).
Početkom 60-ih V. F. Krotov razvio je novu metodu za rješavanje varijacijskih problema, koja se temelji na dovoljnom uvjetu optimalnosti, kasnije nazvanom Krotovljev princip optimalnosti. Ali prije nego što se upoznamo s ovim principom, razmotrimo općenitiju formulaciju problema optimalna kontrola.
Rješenje problema optimalnog upravljanja u klasi podjelno kontinuiranih upravljanja i podjelno glatkih trajektorija ne postoji uvijek. Preporučljivo ga je generalizirati na način da se proširi klasa problema optimalnog upravljanja koji imaju rješenje.
Neka su objekt, ograničenja i rubni uvjeti navedeni na sljedeći način:
Ovdje, za svaki fiksni, postoji određeni skup prostora. Označimo skupom parova komadno kontinuiranih funkcija i komadno glatkih (kontinuiranih i komadno diferencijabilnih) funkcija definiranih na i zadovoljavaju jednadžbu na tom intervalu, s izuzetkom konačnog broja točaka, ograničenje na cijeli interval i rubni uvjeti (10.70). Skup se naziva dopustivim
skup, a njegovi elementi su dopustivi parovi, a skupu je dana funkcionalnost
Traži se pronaći niz dopustivih parova na kojima funkcional (10.71) teži svojoj najniža vrijednost na setu
Takav niz naziva se minimiziranje. Niz dopustivih parova nazivat ćemo i dopustivim nizom.
Glavna generalizirajuća točka u novoj formulaciji je da se minimizirajući niz uzima kao rješenje problema optimalne kontrole, a ne specifični dopustivi par. U posebnom slučaju kada postoji dopustivi par koji daje minimum funkcionalu (10.71), svi članovi minimizirajućeg niza jednaki su ovom paru: .
Primjer 10.12. Razmotrimo malo modificirani Boltzov primjer [11]:
Najmanja vrijednost (točan infimum) funkcionala jednaka je nuli i postiže se na nizu